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1、多肽LGFPTTKTYFPHF和WYPWT是首次在豬血紅蛋白中分離出具有較高體外降血壓活性的血紅蛋白片段,對(duì)血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)換酶(ACE)抑制活性(IC<,50>)分別為4.92 μM和6.02μM,另具抗胃腸道酶水解活性,動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)表明這兩個(gè)多肽屬于ACE的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。 本文以ACE抑制肽的構(gòu)效關(guān)系為研究目的,針對(duì)多肽中氨基酸的組成及序列的改變對(duì)活性的影響開(kāi)展工作。以LGFPTTKTYFPHF和VVYPWT為研究骨架,合成了L
2、GFPTTKTYFPHF和VVYPWT以及15種類(lèi)似物,分別研究C-端和N-端氨基酸殘基對(duì)多肽ACE抑制活性的影響,為多肽類(lèi)ACE抑制劑作為抗高血壓藥物進(jìn)行積極探索。 本文采用多肽固相合成方法,選用Wang樹(shù)脂為固相載體,運(yùn)用正交保護(hù)策略,以Fmoc為α-氨基保護(hù)基,HBTU-HOBt·H<,2>O為縮合劑,合成了LGFPTTKTYFPHF和VVYPWT及其類(lèi)似物1 7個(gè)多肽序列,粗產(chǎn)物經(jīng)凝膠層析和RP-HPLC進(jìn)行制備,由RP
3、-HPLC和ESI-MS對(duì)多肽進(jìn)行表征。 本文將合成的17個(gè)多肽序列進(jìn)行體外ACE抑制活性測(cè)定并與天然分離物質(zhì)進(jìn)行對(duì)比,其中LGFPTTKTYFPHF、GFPTTKTYFPHF、FPTTKTYFPHF、PTTKTYFPHF、TTKTYFPHF、TKYFPHF和VVYPWT7個(gè)序列活性較高,與天然分離物質(zhì)相近。結(jié)果表明多肽C-端為芳香族氨基酸(如Phe)時(shí)往往表現(xiàn)出較高的ACE抑制活性,而N-端含有脂肪族氨基酸則能夠增強(qiáng)其抑制活性
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