氟伐他汀對抗磷脂綜合征患者血清誘導人血管內皮細胞MMP-9的影響.pdf

1、目的：1、探討不同濃度抗磷脂綜合征(APS)患者血清對人血管內皮細胞MMP-9的誘導作用。2、探討不同濃度氟伐他汀對抗磷脂綜合征患者血清誘導的人血管內皮細胞MMP-9的影響。
　　 材料與方法：
　　 1、細胞培養(yǎng)和分組體外培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)，待細胞生長到融合狀態(tài)，將細胞隨機分五組。分別用RPMI1640培養(yǎng)液、不同濃度健康人血清(25％、50％、100％)、不同濃度APS患者血清(25％、50％、100

2、％)、不同濃度APS患者血清+不同濃度的氟伐他汀(2.5、5和10μmol/L)、不同濃度APS患者血清+不同濃度的氟伐他汀(2.5、5和10μmol/L)+甲羥戊酸(0.2mmol/L)處理。不同濃度氟伐他汀于甲羥戊酸作用1h后加入，APS患者血清及RPMI1640培養(yǎng)基于氟伐他汀作用1h后加入，分別于12h、24h、48h后收集細胞。
　　 2、倒置相差顯微鏡觀察HUVEC的分布及形態(tài)。
　　 3、雙抗體夾心酶聯(lián)免疫

3、吸附試驗(ELISA)檢測細胞培養(yǎng)液中MMP-9濃度。
　　 4、RT-PCR檢測MMP-9mRNA的表達水平。
　　 5、Western-blot印跡法檢測核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白的表達水平。
　　 結果：一、APS患者血清對人血管內皮細胞MMP-9的影響。
　　 1、APS患者血清作用于HUVEC后，與空白對照組及正常血清組相比，細胞培養(yǎng)液中APSMMP-9濃度總體呈逐漸升高趨勢，隨

4、APS患者血清濃度升高而升高(P＜0.05)，并于作用24h時達高峰。
　　 2、APS患者血清作用于HUVEC后，與空白對照組及正常血清組相比，NF-κBp65表達明顯增加(P＜0.05)。
　　 二、氟伐他汀對APS患者血清誘導的人血管內皮細胞MMP-9的影響。
　　 1、與對照組相比，氟伐他汀對APS患者血清誘導的人血管內皮細胞MMP-9及NF-κBp65表達增加有劑量依賴性抑制作用(P＜0.05)。

5、>　　 2、氟伐他汀對APS患者血清誘導的人血管內皮細胞MMP-9及NF-κBp65表達增加的抑制作用可被甲羥戊酸阻斷(P＜0.05)。
　　 結論：1、APS患者血清可誘導人血管內皮細胞MMP-9及NF-κBp65的表達增加，為DVT合并APS的發(fā)病機制、臨床活動性判斷及疾病轉歸提供有利線索。
　　 2、氟伐他汀可抑制APS患者血清誘導的人血管內皮細胞MMP-9表達增加，保護血管內皮細胞，抑制血栓形成。