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文檔簡介
1、本文首先以人肝臟組織RNA為模板，利用高保真酶進行RT-PCR分別得到了血管抑制素和內(nèi)皮抑制素基因，將AS、ES片段通過Linker連接形成融合基因，構建了原核表達質粒pET-42(b)/AS-ES，以大腸桿菌BL21(DE3)為宿主，在IPTG的誘導下得到了目的蛋白的表達。通過對培養(yǎng)基、誘導溫度、誘導時間、IPTG濃度條件優(yōu)化，確定實驗室規(guī)模下最佳表達條件為2×YT培養(yǎng)基，1.0mMIPTG，42℃誘導3h以上，最高表達豐度達到菌體總
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