基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的芪參益氣方抗心肌缺血整合作用研究.pdf

1、中藥復(fù)方藥效物質(zhì)及其作用機(jī)制的研究是中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵科學(xué)問題之一。秉承中醫(yī)整體論的治病理念，中藥復(fù)方與復(fù)雜性疾病之間的相互作用是“系統(tǒng)-系統(tǒng)”的非線性、復(fù)雜作用模式，因而采用傳統(tǒng)方法難以滿足揭示這種復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)狀關(guān)聯(lián)關(guān)系。近年興起的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和系統(tǒng)生物學(xué)試圖從宏觀或整體調(diào)控的角度詮釋藥物對生物網(wǎng)絡(luò)的作用，為中藥復(fù)方作用機(jī)制研究提供了新的研究思路和技術(shù)手段。在臨床上芪參益氣方用于治療缺血性心臟病，其有效性已得到循證醫(yī)學(xué)的研究證實(shí)，但芪參益氣方

2、抗心肌缺血的整合作用還缺乏系統(tǒng)性研究，阻礙了芪參益氣方被國際市場認(rèn)可和接受的進(jìn)程。鑒于此，本論文運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法和技術(shù)，開展芪參益氣方抗心肌缺血作用研究，通過整合分子、細(xì)胞及動物水平的多層次研究，初步詮釋其多成分組合、多靶點(diǎn)、多途徑的整合協(xié)同作用模式。
　　主要研究內(nèi)容如下:
　　1、構(gòu)建了冠心病網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究平臺CHD@ZJU V2.0，并開展相關(guān)網(wǎng)絡(luò)分析。通過整合文獻(xiàn)、疾病相關(guān)公開數(shù)據(jù)庫及蛋白-蛋白相互作用關(guān)系等資源，

3、構(gòu)建冠心病疾病網(wǎng)絡(luò)，并采用網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)、子簇聚類及生物功能GO等開展網(wǎng)絡(luò)分析，結(jié)果顯示與疾病發(fā)病機(jī)制相關(guān)的生物學(xué)途徑主要有:免疫炎癥反應(yīng)、血管生成、缺氧和氧化應(yīng)激反應(yīng)、能量代謝等;
　　2、研究了芪參益氣方主要代表性成分對疾病網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控作用。采用文本知識挖掘技術(shù)得到芪參益氣方主要成分的作用靶點(diǎn)信息，構(gòu)建藥物-疾病網(wǎng)絡(luò)，研究通過網(wǎng)絡(luò)分析發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg1(Rg1)和丹參素(DSS)的共同作用靶點(diǎn)是JUN、MAPK8和MAPK3，黃芪甲

4、苷(Ast)的心血管藥理作用與免疫炎癥反應(yīng)、細(xì)胞遷移、粘附及血液循環(huán)等相關(guān);
　　3、研究了主要活性成分Ast、DSS、Rg1和反式橙花叔醇(ENL)單給及其組合給藥抗大鼠急性心肌梗死(AMI)的藥效作用，發(fā)現(xiàn)Ast和DSS能顯著減小心肌梗死范圍，組合給藥能更顯著地減小梗死范圍。進(jìn)一步的轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析結(jié)果表明，免疫炎癥、血管生成、心室重構(gòu)和心肌修復(fù)、能量代謝等可能是四個成分發(fā)揮多靶點(diǎn)、多途徑整合協(xié)同作用對抗AMI的關(guān)鍵生物學(xué)途徑;<

5、br>　　4、采用H9C2心肌細(xì)胞缺氧、氧化應(yīng)激損傷模型，研究四個主要成分對心肌細(xì)胞的協(xié)同保護(hù)作用。Ast，DSS和Rg1能對抗H9C2缺氧損傷及氧化應(yīng)激損傷，四個成分的低濃度組合給藥能協(xié)同增強(qiáng)抗心肌細(xì)胞缺氧損傷作用;
　　5、采用LPS誘導(dǎo)RAW264.7炎癥反應(yīng)模型，研究四個主要成分的協(xié)同抗炎作用。研究發(fā)現(xiàn)倍半萜烯類成分ENL、SDL和RDL對LPS誘導(dǎo)NO分泌具有不同程度的抑制作用。DSS和Rg1兩成分組合能協(xié)同增強(qiáng)對抗LP