PGC-1α對VEGF-A啟動子調(diào)節(jié)研究.pdf

1、VEGF-A是PDGF/VEGF生長因子家族成員之一，是一種內(nèi)皮細(xì)胞特異性的絲裂源。VEGF-A表現(xiàn)出多種功能，包括增加血管通透性、誘導(dǎo)內(nèi)皮祖細(xì)胞等分化形成血管以及誘導(dǎo)已經(jīng)存在的血管產(chǎn)生新的分支、促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移和抑制細(xì)胞凋亡等。PGC-1a是核受體家族的輔激活因子，可以和多種核受體相互作用直接或間接與靶基因的啟動子結(jié)合，從而激活靶基因的轉(zhuǎn)錄。研究發(fā)現(xiàn)，PGC-1a是調(diào)節(jié)細(xì)胞能量代謝的關(guān)鍵因子，冷暴露，營養(yǎng)缺乏，低氧等條件將誘導(dǎo)PGC-

2、1a的表達(dá)。此外，PGC-1a還參與糖脂代謝的調(diào)節(jié)。
　　 本課題組研究表明，在HepG2細(xì)胞和C2C12肌管細(xì)胞中PGC-1a能調(diào)節(jié)VEGF-A的表達(dá)。為了研究PGC-1a是否通過激活VEGF-A啟動子來上調(diào)VEGF-A的表達(dá)，我們構(gòu)建了VEGF-A啟動子驅(qū)動的報告基因系統(tǒng)，用TK啟動子驅(qū)動的報告基因作為內(nèi)參照，發(fā)現(xiàn)PGC-1a能激活VEGF-A啟動子活性3到4倍。為了進(jìn)一步研究在調(diào)節(jié)VEGF-A啟動子過程中與PGC-1a相互

3、作用的核受體，我們分析了VEGF-A啟動子的核苷酸序列，發(fā)現(xiàn)有多種核受體的保守結(jié)合位點(diǎn)，因此我們采用了啟動子5'系列缺失的方法進(jìn)行研究。
　　 本研究發(fā)現(xiàn)PGC-1a與ERRa共轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞可以激活VEGF-A啟動子活性5到6倍。進(jìn)一步用表達(dá)PGC-1a的腺病毒感染HepG2細(xì)胞和C2C12肌管細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)PGC-1a可以上調(diào)VEGF-AmRNA約4倍。培養(yǎng)的C2C12肌管細(xì)胞感染表達(dá)PGC-1a的腺病毒后，收集條件培養(yǎng)基并