血管抑素對(duì)肺癌生物學(xué)行為的影響及抑制腫瘤血管形成分子機(jī)制的研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文血管抑素對(duì)肺癌生物學(xué)行為的影響及抑制腫瘤血管形成分子機(jī)制的研究姓名：張玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：楊向紅20080401與微血管密度的關(guān)系，明確其在肺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中的作用及其與臨床病理之間的關(guān)系。二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：采用人肺癌A 5 4 9 細(xì)胞建立c 5 7 B L ／6 近交系小鼠移植瘤模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)A n g i o s t a t i n 治療肺癌的有效性。4 8 只荷人肺癌

2、A 5 4 9 C 5 7 B L ／6 近交系小鼠( 皮下移植瘤) 分成4 組，分別皮下腫瘤內(nèi)注射A n g i o s t a t i n ( 濃度分別為0 ．6 m g ／K g 、1 ．2m g ／K g 、2 ．4m g ／k g ) ，對(duì)照組注射等量生理鹽水。注射次數(shù)1 次／2 d ，治療1 4 天，觀察腫瘤重量的變化；并用常規(guī)病理方法和免疫組化S ．P 法檢測(cè)腫瘤組織中細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變和C D 3 4 、S u r v i

3、 v i n 和N F - KB 的表達(dá)，計(jì)數(shù)微血管密度( M V D ) ，觀察A n g i o s t a t i n對(duì)人肺癌小鼠移植瘤新生血管形成的影響。三、體外培養(yǎng)：在體外研究中培養(yǎng)H U V E C s 和人肺癌A 5 4 9 細(xì)胞，應(yīng)用M T T 比色法檢測(cè)血管抑素對(duì)H U V E C s 和A 5 4 9 細(xì)胞增殖活性的影響，臺(tái)盼蘭染色細(xì)胞計(jì)數(shù)法觀察血管抑素對(duì)人肺癌A 5 4 9 和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的影響；建立腫瘤微血管

4、模型觀察血管抑素對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞管腔形成的影響；流式細(xì)胞術(shù)分析血管抑素對(duì)H U V E C s 細(xì)胞生長(zhǎng)周期的影響。通過蛋白印記法檢測(cè)血管抑素對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞作用的信號(hào)傳導(dǎo)途徑及其相關(guān)因子的表達(dá)，初步探討血管抑素抗新生血管形成作用的分子機(jī)制。結(jié) 果一、人體材料檢測(cè)結(jié)果：肺癌組織中A n g i o s t a t i nm R N A 表達(dá)量為5 ．5 6 士1 ．4 0 ，癌旁肺組織m R N A 表達(dá)量為7 ．8 5 + 1 ．7 4 ；

5、V E G F m R N A 表達(dá)量癌組織為1 2 ．4 3 ±1 ．5 8 ，癌旁組織為9 ．1 0 + 1 ．2 0 。組間比較差異顯著( P < o ．0 5 ) ；A n g i o s t a t i nm R N A 在I ．I I 期肺癌組織中表達(dá)量為9 ．4 1 ±2 ．2 9 ，在I I I ．Ⅳ期肺癌組織中表達(dá)量為5 ．2 6 - { - 2 ．3 9 ，后者表達(dá)水平較前者明顯降低，差異顯

6、著( P < O ．0 5 ) ；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的A n g i o s t a t i nm R N A 表達(dá)水平低于無轉(zhuǎn)移組，差異顯著( P < 0 ．0 5 ) 。 V E G Fr n R N A 在I ．I I 期肺癌組織中表達(dá)為9 ．7 9±1 ．4 5 ，在I I I ．Ⅳ期肺癌組織中表達(dá)為1 6 ．8 3 ±2 ．3 8 ，后者表達(dá)水平明顯高于前者，差異極顯著( P ( 0 ．0 1 )