脫氧雪腐鐮刀菌烯醇對人正常食管鱗狀上皮細胞抗原提呈相關分子及凋亡影響的實驗研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文脫氧雪腐鐮刀菌烯醇對人正常食管鱗狀上皮細胞抗原提呈相關分子及凋亡影響的實驗研究姓名：孫巍申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：李月紅張祥宏20090301中文摘要核細胞抗原提呈分子的表達。因此，認為細胞HLAabc分子表達降低，可能有助于細胞逃避免疫監(jiān)視，使癌變發(fā)生成為可能。但有關DON對食管鱗狀上皮細胞直接作用的研究，國內(nèi)外尚未見文獻報道。本研究運用細胞培養(yǎng)，免疫細胞化學，流式細胞定量檢測，Wes

2、ternblot，RTPCR方法檢測了不同劑量DON處理24小時后，原代培養(yǎng)的正常食管鱗狀上皮細胞HLAabe、TAP1、LMP2、ERK和PERK蛋白表達變化情況，同時檢測了細胞凋亡，探討分析了DON對正常食管鱗狀上皮細胞抗原提呈分子的影響規(guī)律和對細胞凋亡的可能影響。從免疫角度探討DON對機體免疫功能的可能影響，初步揭示DON暴露在我國食管癌高發(fā)區(qū)腫瘤發(fā)生發(fā)展中的可能作用。方法：l成人食管鱗狀上皮細胞原代培養(yǎng)將取材的正常食管粘膜，在無

3、菌條件下反復沖洗。置于1640培養(yǎng)液中，盡量剪除粘膜下血管和結締組織，將粘膜剪成2mm2左右的小塊。置于涂布胎牛血清的培養(yǎng)瓶中，粘膜面均朝上，加入少量DMEM：F12(1：1)混合培養(yǎng)基，使組織塊濕潤，在48小時內(nèi)將瓶中的培養(yǎng)基加到2ml。37℃5％C02的培養(yǎng)箱培養(yǎng)。以后每2—3天換液一次。21天上皮細胞可布滿瓶底。2食管鱗狀上皮細胞的鑒定倒置顯微鏡下觀察細胞細胞形態(tài)和生長情況，細胞爬片后用廣譜CK進行免疫細胞化學染色，鑒定細胞來源。