臨床分離大腸埃希菌的耐藥性及分子生物學(xué)研究.pdf

1、目的:對臨床分離大腸埃希菌進(jìn)行體外抗生素的敏感實(shí)驗(yàn)和檢測產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(Extended-spectrumβ-lactamases ESBLs)株陽性率,了解本地區(qū)大腸埃希菌的耐藥性和產(chǎn)ESBLs菌株分布及其表型,分析ESBLs陽性菌株與非產(chǎn)ESBLs菌株的耐藥性差異;并檢測試驗(yàn)菌株中qnr基因的分布,調(diào)查qnr陽性菌株中產(chǎn)ESBLs的情況,研究qnr基因克隆流行傳播情況。
　　方法:采用瓊脂平皿稀釋法對臨床分離183株大腸

2、埃希菌進(jìn)行體外抗菌藥物敏感性測定,雙紙片確證實(shí)驗(yàn)檢測ESBLs并分析其耐藥表型,采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析產(chǎn)ESBLs株與非產(chǎn)ESBLs株的耐藥差異性。用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法擴(kuò)增qnr基因,PCR產(chǎn)物純化測序并在Genbank上比對測序結(jié)果,明確qnr基因類別;通過轉(zhuǎn)移結(jié)合實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒,并測定受體菌及結(jié)合子的最低抑菌濃度(MIC);及其產(chǎn)ESBLs情況;堿性裂解法提取質(zhì)粒;應(yīng)用ERIC-PCR及質(zhì)粒酶切圖譜分析qnr陽性

3、株及質(zhì)粒克隆流行傳播情況。
　　結(jié)果:大腸埃希菌對各種抗菌藥物的耐藥率分別為:哌拉西林(84.0％)頭孢呋辛(84.0%),頭孢唑啉(84.9%),頭孢噻肟(73.2%),頭孢他啶(44.3%)頭孢吡哦(51.0%)環(huán)丙沙星(84.6%),左氧沙星(80.7%),加替沙星(77.4%)亞胺培南(0%)阿米卡星(28.5%)慶大(78.0%)氨曲南(51.1%)氯霉素(61.5%);大腸埃希菌中產(chǎn)ESBLs菌株的發(fā)生率為67.2%,

4、以CTX表型為主。產(chǎn)ESBLs菌株對多種抗菌藥物的耐藥率顯著高于非產(chǎn)ESBLs菌株P(guān)(<0.05)。共檢出7株菌株含有qnr基因,3株qnrA1,1株qnrB2,3株qnrS1,其中的5株檢出產(chǎn)ESBLs,轉(zhuǎn)移結(jié)合實(shí)驗(yàn)成功率為57.1%(4/7),結(jié)合子對喹諾酮類藥物的敏感性有所下降;ERIC-PCR以及質(zhì)粒酶切產(chǎn)物電泳結(jié)果示沒有一致條帶。
　　結(jié)論:本地區(qū)的大腸埃希菌對多種抗菌藥物呈高耐藥性,與非產(chǎn) ESBLs菌株相比產(chǎn)ESBL