大腸埃希菌生物被膜形成能力測定及其耐藥性分析.pdf

1、大腸埃希菌是常見的院內(nèi)感染細(xì)菌之一，常能引起多種腸內(nèi)外的感染。細(xì)菌持續(xù)產(chǎn)生生物被膜的能力是細(xì)菌的主要致病因素之一，尤其是在許多的內(nèi)置器械相關(guān)感染中。通常抗菌藥物常規(guī)劑量是無法滲透入生物被膜內(nèi)部的，不能殺滅細(xì)菌，導(dǎo)致感染反復(fù)發(fā)作。如何有效突破細(xì)菌生物被膜的防御作用并殺滅細(xì)菌，對(duì)于治療感染至關(guān)重要。因此研究大腸埃希菌在形成生物被膜情況以及對(duì)各藥物敏感性的變化，可為臨床合理用藥提供依據(jù)。
　　目的:建立大腸埃希菌生物被膜體外形成模型，檢

2、測臨床中分離出的菌株生物被膜形成能力。比較6種抗菌藥物對(duì)大腸埃希菌的最低抑菌濃度和生物被膜抑制濃度。
　　方法:本研究收集某院急性腹瀉患者糞便和急性尿路感染尿液臨床標(biāo)本中分離的大腸埃希菌82株，用微量稀釋法測定藥物（氨芐西林、頭孢噻肟、左氧氟沙星、慶大霉素、環(huán)丙沙星、亞胺培南）的最低抑菌濃度（MIC）。用結(jié)晶紫染色法檢測生物被膜形成能力，從中篩選出能形成生物被膜的大腸埃希菌，采用平板培養(yǎng)法構(gòu)建細(xì)菌生物被膜的體外模型，檢測生物被膜抑

3、制濃度（BIC）。比較藥物的最低抑菌濃度與生物被膜抑制濃度。
　　結(jié)果：
　　1.大腸埃希菌生物被膜形成能力的研究
　　采用結(jié)晶紫染色法對(duì)來源于糞便62株和尿液20株的大腸埃希菌進(jìn)行定量分析。以ATCC25922為質(zhì)控菌株，以不加菌株的空白孔為陰性對(duì)照。生物被膜形成能力的判斷標(biāo)準(zhǔn)為：（-）：OD≤ODC；（+）： ODC4×ODC。ODC定義

4、為陰性對(duì)照孔3個(gè)復(fù)孔吸光度平均值的標(biāo)準(zhǔn)差的3倍。OD定義為每株菌3個(gè)復(fù)孔吸光度的平均值。采用此標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果顯示，所有菌株均形成生物被膜，其中11株生物被膜形成能力為弱陽性，其中1株來源于尿液標(biāo)本，10株來源于糞便標(biāo)本；67株為陽性，其中16株來源于尿液標(biāo)本，51株來源于糞便標(biāo)本；4株為強(qiáng)陽性，其中3株來源于尿液標(biāo)本，1株來源于糞便標(biāo)本。所以，產(chǎn)生以產(chǎn)生中等量生物被膜的細(xì)菌為多。
　　2.藥物對(duì)大腸埃希菌的最低抑菌濃度
　　用微量

5、稀釋法檢測82株大腸埃希菌產(chǎn)生生物被膜的能力。依據(jù)此法，結(jié)果顯示82株生物被膜形成能力為陽性的菌株，對(duì)氨芐西林、頭孢噻肟、左氧氟沙星、慶大霉素、環(huán)丙沙星、亞胺培南的耐藥率分別為80.5％(66/82)、45.1%(37/82)、26.8%(22/82)、35.4%(29/82)、43.9%(36/82)、6.1%(5/82)。因此，結(jié)果顯示82株大腸埃希菌對(duì)亞胺培南的耐藥性最低，部分菌株具有多重耐藥性。
　　3.藥物對(duì)細(xì)菌的生物被

6、膜抑制濃度
　　采用平板培養(yǎng)法構(gòu)建細(xì)菌生物被膜的體外模型，依據(jù)CLSI2014判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析。結(jié)果顯示對(duì)氨芐西林、頭孢噻肟、左氧氟沙星、慶大霉素、環(huán)丙沙星、亞胺培南的耐藥率分別為100%(82/82)、81.7%(67/82)、90.2%(74/82)、87.8%(72/82)、67.1%(55/82)、25.6%(21/82)。
　　結(jié)論：由此可得出，來源于急性腹瀉患者糞便和急性尿路感染尿液的大腸埃希菌菌株產(chǎn)生生物被膜能