表達(dá)可溶性TGF-βRⅡ胞外區(qū)和RANTES基因的腺病毒載體構(gòu)建以及聯(lián)合用于腫瘤治療的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文表達(dá)可溶性TGF-βRⅡ胞外區(qū)和RANTES基因的腺病毒載體構(gòu)建以及聯(lián)合用于腫瘤治療的實(shí)驗(yàn)研究姓名：史業(yè)輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：郝希山20040601天津醫(yī)科火學(xué)博士學(xué)位論文國(guó)外已有許多研究方法去嘗試阻斷T G F —B 的抑制免疫系統(tǒng)的功能。其中有利用T G F —B 的抗體去中和T G F 一0 ，或者利用反義核酸技術(shù)封閉T G F 一1 3 ，但這些方法效果不佳，或是操作繁復(fù)，或是對(duì)患者選

2、擇性強(qiáng)，或是結(jié)果欠穩(wěn)定，不適于臨床應(yīng)用。本研究擬從T G F —B 入手，構(gòu)建可溶性T G F —B1 1 型受體( T 1 3R I I ) 胞外區(qū)編碼序列重組腺病毒，使之在腫瘤細(xì)胞內(nèi)高效表達(dá)，有效封阻T G F B 的免疫抑制作用，揮發(fā)機(jī)體抗腫瘤免疫，延長(zhǎng)患者生存期。應(yīng)用腺病毒攜帶可溶性T G F —BI I 型受體( T BR I I ) 胞外區(qū)編碼序列，方法簡(jiǎn)便，安全，適用范圍廣，適于臨床應(yīng)用。同時(shí)為了強(qiáng)化腫瘤局部的免疫應(yīng)答，本

3、研究又進(jìn)一步引入趨化因子R A N T E S ( R e d u l a t e d u p o n a c t j v a t i o n ．n o r m M T - c e l 卜e x p r e s s e d a n ds e c r e t e d ，活化T 細(xì)胞表達(dá)和分泌的調(diào)節(jié)因子) 。R A N T E S 由T 細(xì)胞等免疫細(xì)胞分泌的，其最早是在對(duì)淋巴細(xì)胞活化晚期基因表達(dá)的篩選中發(fā)現(xiàn)的，屬于C C 家族。R A N

4、T E S 對(duì)單核細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞，尤其是C D 4 + C D 4 5 R O + 的T 淋巴細(xì)胞，以及N K 、肥大細(xì)胞等均有特異性趨化活性。另外其還能局部刺激那些具有靜止表型或記憶表型的C D 4 q 一、C D 8 + T 細(xì)胞活化”1 ，更為有利的是R A N T E S也是樹突狀細(xì)胞( D e n d r i t i cc e l lD C ) 有效的化學(xué)吸附因子川。構(gòu)建可溶性T G F —BI I 型受體編碼序列與R A

5、 N T E So D N A 全長(zhǎng)的腺病毒重組載體，感染腫瘤細(xì)胞后表達(dá)的可溶性T G F 一口I I 型受體可以在細(xì)胞外基質(zhì)中和腫瘤細(xì)胞過表達(dá)的T G F 一0 而不產(chǎn)生信號(hào)傳導(dǎo)，因此可以有效的封阻T G F —B ，打破免疫抑制。同時(shí)表達(dá)的R A N T E S 特異性趨化T 淋巴細(xì)胞、N K 、單核細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞至腫瘤周圍，激活腫瘤周圍靜止及記憶的T 細(xì)胞，刺激I L 一2 、I F N —Y 等細(xì)胞因子分泌，加強(qiáng)局部免疫環(huán)境，