多囊蛋白—2在腎組織中的表達(dá)及在ADPKD發(fā)病機(jī)制中的作用研究.pdf

1、常染色體顯性遺傳性多囊腎病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是一種常見的單基因遺傳性疾病.它以雙腎多發(fā)生囊腫為特征,囊腫不斷形成和進(jìn)行性增大,導(dǎo)致腎功能下降,到60歲時(shí)大約有50％的患者進(jìn)展至終末期腎衰.目前已知引起ADPKD的基因主要有二個(gè),分別命名為PKD1和PKD2.PKD2定位于4號染色體2區(qū)1帶到2區(qū)3帶(4q21-23),大約15％的ADPKD是由其突變引

2、起的,其翻譯產(chǎn)物為多囊蛋白-2,該蛋白含有968個(gè)氨基酸,其氨基端和羧基端均位于胞漿內(nèi),具有電壓激活的鈣離子通道功能.ADPKD的發(fā)病機(jī)理目前還不甚清楚.該課題旨在觀察PKD2基因及其翻譯產(chǎn)物在腎組織中的表達(dá),探討ADPKD可能的發(fā)病機(jī)制.該課題主要做了以下幾方面的工作:(1)通過原位雜交和RT-PCR方法,觀察到正常成人腎組織、胎腎組織、甲狀腺組織以及血管組織中有PKD2基因的表達(dá),而在肝臟、胰腺、小腸、胃、脾臟、腦組織、食管等人體組

3、織中沒有PKD2基因的表達(dá).(2)應(yīng)用免疫組化、免疫熒光和western-blot方法,發(fā)現(xiàn)在正常成人腎組織、胎腎組織、MDCK細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞中有明顯的多囊蛋白—2表達(dá),在2型多囊腎組織中偶有微弱的表達(dá).(3)應(yīng)用免疫組化雙染色和免疫熒光方法,發(fā)現(xiàn)在正常成人腎組織、胎腎組織、體外培養(yǎng)的MDCK細(xì)胞和LLC-PK1細(xì)胞中有小管相關(guān)蛋白-α的表達(dá),在2型多囊腎組織中也存在少量的表達(dá).除了在上述組織和細(xì)胞的胞內(nèi)觀察到這兩種蛋白的表達(dá)