K562細(xì)胞條件培養(yǎng)基對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞氧化還原態(tài)的影響及其在腫瘤血管生成中的意義.pdf

1、腫瘤的抗血管生成治療是目前有較好應(yīng)用前景的治療策略。針對(duì)腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞某一靶點(diǎn)的藥物是現(xiàn)階段抗血管生成治療的主要研究方向，并取得了一些可喜的成果。但由于機(jī)體內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞的調(diào)控是一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，影響因素眾多，因此，針對(duì)單一靶點(diǎn)的藥物往住具有各種局限性，這也限制了其達(dá)到理想效果。 由于腫瘤細(xì)胞對(duì)血管具強(qiáng)烈的促增殖效應(yīng)，同時(shí)又顯示出明顯的氧化還原態(tài)的偏移，那么兩者之間是否有關(guān)聯(lián)?在不改變促血管生成因子的前提下，改變內(nèi)皮細(xì)胞的氧

2、化還原態(tài)是否可以改變腫瘤細(xì)胞對(duì)血管的促增殖效應(yīng)?上述問題的闡明，不僅具有明確的理論價(jià)值，亦具有誘人的應(yīng)用前景。 我們選用慢性髓性白血病(chronicmyelogenousleukemia，CML)細(xì)胞系K562細(xì)胞的條件培養(yǎng)基作為腫瘤促內(nèi)皮增殖的體外模擬物，觀察人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(humanumbilicalveinendothelialcells，HUVEC)在它的作用下氧化還原態(tài)與細(xì)胞增殖活力的變化情況。同時(shí)以GSH特異

3、性合成抑制劑丁胱亞磺酰亞胺(buthioninesulfoxine，BSO)作用于內(nèi)皮細(xì)胞，改變其氧化還原態(tài)，觀察其氧化還原態(tài)及增殖活力的變化。以了解血管內(nèi)皮細(xì)胞在腫瘤的影響下，氧化還原態(tài)及細(xì)胞增殖活力的改變，探尋兩者的內(nèi)在聯(lián)系，以期從調(diào)控氧化還原態(tài)的角度尋找一條抗腫瘤血管生成治療的新策略。 結(jié)果表明，CML細(xì)胞系K562細(xì)胞條件培養(yǎng)基具促內(nèi)皮細(xì)胞增殖的能力，該效應(yīng)并顯示出一定的量-效關(guān)系。在條件培養(yǎng)基的作用下，內(nèi)皮細(xì)胞的GSH

4、、GSSG、NADPH、NADP+的含量亦有明顯增長(zhǎng)，且條件培養(yǎng)基的該項(xiàng)作用同樣顯示出劑量-效應(yīng)關(guān)系。兩者間的相關(guān)分析顯示，K562細(xì)胞條件培養(yǎng)基對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞氧化-還原對(duì)濃度的影響與促內(nèi)皮細(xì)胞增殖活力之間具有明顯的正相關(guān)關(guān)系。提示，腫瘤細(xì)胞促血管新生可能通過影響內(nèi)皮細(xì)胞的氧化-還原態(tài)而發(fā)揮作用。 以BSO耗竭內(nèi)皮細(xì)胞的GSH，同時(shí)加入K562細(xì)胞條件培養(yǎng)基時(shí)，內(nèi)皮細(xì)胞的GSSG/GSH比值和NADP+/NADPH比值明顯地偏向氧化

5、應(yīng)激，且條件培養(yǎng)基濃度與GSSG/GSH比值和NADP+/NADPH比值的變化之間呈顯著正相關(guān)。內(nèi)皮細(xì)胞的增殖活力明顯下降，且內(nèi)皮細(xì)胞的增殖活力與GSSG/GSH、NADP+/NADPH比值呈顯著負(fù)相關(guān)，內(nèi)皮細(xì)胞的增殖活力與條件培養(yǎng)基濃度亦呈顯著負(fù)相關(guān)。此時(shí)，K562細(xì)胞條件培養(yǎng)基內(nèi)在的促血管生成因子等因素并未改變，僅以BSO耗竭了內(nèi)皮細(xì)胞GSH，顯著降低了其抗氧化能力，因此，此時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞增殖活力的改變當(dāng)主要受細(xì)胞氧化-還原狀態(tài)改變的影