苦參堿對(duì)A549細(xì)胞條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移的影響及機(jī)制.pdf

1、背景與目的:苦參堿是中國(guó)傳統(tǒng)中藥槐根的主要生物堿成分之一，具有抗炎、抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡等作用。絲裂原活化蛋白激酶/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶(Motigen-activated proteinkinase/extracelluar regulated protein kinase，MAPK/ERK)級(jí)聯(lián)通路是血管內(nèi)皮細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要途徑。本研究通過(guò)觀察苦參堿及MAPK/ERK特異性抑制劑PD98059對(duì)肺腺癌A549

2、細(xì)胞條件培養(yǎng)基(A549 human lung cancer cells conditioned medium，A549CM)誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical veins endothelial cells，HUVECs)增殖、遷移及磷酸化ERK(p-ERK)表達(dá)的影響,探討苦參堿有無(wú)抗肺癌血管生成的作用及可能的作用機(jī)制。
　　 方法:應(yīng)用Mat與MAPK/ERK特異性抑制劑PD98059(PD)處理A54

3、9CM培養(yǎng)的HUVECs，采用細(xì)胞計(jì)數(shù)、劃痕損傷實(shí)驗(yàn)和Western blot技術(shù)，觀察苦參堿、PD98059對(duì)A549CM誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移及磷酸化ERK(p-ERK)表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果:干預(yù)后24 h，與對(duì)照組相比，A549CM組細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯增多【(8.63±0.74)×104/mL vs.(3.60±0.26)×104/mL，P<0.01】，裸露間距明顯縮短【(0.19±0.03)mm vs.(0.80

4、±0.02)mm，P<0.01】，p-ERK表達(dá)(p-ERK/β-actin)顯著增強(qiáng)(0.88±0.02 vs.0.59±0.04，P<0.01)。與A549CM組相比，A549CM+Mat組細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著減少【(5.06±0.55)×104/mL vs.(8.63±0.74)×104/mL，P<0.01】，裸露間距顯著增寬【(0.56±0.01)mm vs.(0.19±0.03)mm，P<0.001】，p-ERK表達(dá)(p-ERK/β-

5、actin)明顯減弱(0.60±0.09 vs. 0.88±0.02，P<0.01)。與A549CM組相比，A549CM+PD組細(xì)胞計(jì)數(shù)也顯著減少【(5.63±0.15)×104/mL vs.(8.63±0.74)×104/mL，P<0.05】，p-ERK表達(dá)(p-ERK/β-actin)也明顯減弱(0.33±0.08 vs. 0.88±0.02，P<0.01)，但裸露間距無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異【(0.22±0.01)mm vs.(0.19±0.