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文檔簡介
1、HSP27是小熱休克蛋白家族的一個重要成員,其生理功能主要包括保護(hù)細(xì)胞免受各種應(yīng)激因素如自由基、高溫、缺血和毒性物質(zhì)的損傷,促進(jìn)蛋白質(zhì)的正確折疊、組裝,參與細(xì)胞的增殖、分化及細(xì)胞凋亡的信號調(diào)節(jié)等。以往對HSP27的研究側(cè)重于對細(xì)胞凋亡的信號通路的調(diào)控,而在炎癥反應(yīng)的信號通路方面研究較少。本課題對HSP27在炎癥反應(yīng)中細(xì)菌脂多糖(LPS)和白介素1(IL-1β)誘發(fā)的信號通路中的作用進(jìn)行了研究。
在細(xì)菌感染引起的急性炎癥反應(yīng)
2、中,LPS首先激活單核/巨噬細(xì)胞,通過活化特異性轉(zhuǎn)錄因子來合成和釋放大量促炎因子,其中TNF-α及IL-1β是公認(rèn)的最為重要的兩種促炎因子,也是LPS引起的感染性疾病最直接和最關(guān)鍵的炎性介質(zhì)。在先前的研究中發(fā)現(xiàn),HeLa細(xì)胞中HSP27可通過與IKK復(fù)合物的結(jié)合,負(fù)調(diào)控TNFα誘導(dǎo)的NF-κB的信號通路,而HSP27對IL-1β引起的NF-κB信號通路的調(diào)控方式目前了解得還不是很透徹。我們在過表達(dá)(“Overexpression”)或基
3、因敲低(“Knockdown”)HSP27的研究中發(fā)現(xiàn),一方面HSP27通過與TRAF6發(fā)生的蛋白間相互作用,促進(jìn)了IL-1β引起的TRAF6的泛素化及IKK的激活;另一方面,IL-1β通過激活p38-MAPKAPK2-HSP27信號通路,引起HSP27的磷酸化,反過來促使HSP27與TRAF6解離,抑制了TRAF6-IKK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,最終導(dǎo)致IKK的活性下調(diào)。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,不同于HSP27負(fù)調(diào)控TNFα激活的NF-κB信號通路
4、,HSP27以反饋調(diào)節(jié)的方式調(diào)節(jié)IL-1β激活的NF-κB信號通路。
在此基礎(chǔ)上我們進(jìn)一步研究了HSP27對單核巨噬細(xì)胞中LPS激活的IKK和MAPKs信號通路及iNOS和COX-2等炎癥相關(guān)蛋白的合成的影響。結(jié)果表明,在單核巨噬細(xì)胞中HSP27通過影響IKK的信號通路而不是MAPK信號通路,增加了LPS刺激的iNOS及COX-2的產(chǎn)生,進(jìn)一步驗(yàn)證了我們在HeLa細(xì)胞中得到的結(jié)論。
綜上所述,本實(shí)驗(yàn)主要研究了
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