熱休克蛋白增加細菌抗逆性和乙醇產(chǎn)量的研究.pdf

1、大腸桿菌能夠利用戊糖和己糖，產(chǎn)生酸性和中性物質(zhì)，不能大量生成乙醇?？莶菅挎邨U菌能夠利用各種碳水化合物，產(chǎn)生乙酸、乳酸和丙酸等混合酸，不能大量生成乙醇。運動發(fā)酵單胞菌具有高活性丙酮酸脫羧酶(PDC)和乙醇脫氫酶(ADHB)，能很好地發(fā)酵己糖生成乙醇。因此將三者發(fā)酵生成乙醇的特征基因改造、重組，是目前研究的熱點和重點，并且具有廣泛的應用價值和市場潛力。 本研究運用基因工程重組技術，用Lac啟動子調(diào)控運動發(fā)酵單胞菌礎基因和adhb基因

2、，構建能在大腸桿菌中表達的LAP操縱子，可使大腸桿菌發(fā)酵糖生產(chǎn)乙醇；然后導入來自超嗜熱菌強烈火球菌(pvrococcusfvriosus)的小分子熱休克蛋基因(hsp)，構建能在大腸桿菌中表達的LAPH操縱子。同時，構建在枯草芽孢桿菌中表達的BLAP操縱子，使枯草芽孢桿菌發(fā)酵糖生產(chǎn)乙醇；然后導入hsp基因，構建在枯草芽孢桿菌中表達的BLAPH操縱子；用Luxs啟動子替代Lac啟動子，構建能在枯草芽孢桿菌中表達的BSAP操縱子和BSAPH

3、操縱子。并進行了基因工程菌的發(fā)酵耐受性實驗和產(chǎn)乙醇實驗。結果如下： (1)以菌種LAP為對照，熱休克蛋白使菌種LAPH 50oC溫度耐受性提高40.7倍，乙醇的產(chǎn)量增高高達4.74倍： (2)以菌種BSAP為對照，熱休克蛋白使菌種BSAPH的50oC的溫度耐受性增加1倍，5％乙醇耐受性增加0.37倍、10％乙醇耐受性增加4.85倍，乙醇產(chǎn)量增加0.67倍： (3)以菌種BIAP為對照，熱休克蛋白使菌種BIAPH的