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文檔簡介
1、研究目的:研究發(fā)育期癲癇大鼠學(xué)習(xí)記憶的改變,探討其與海馬CaMKⅡ、NMDA受體表達(dá)變化的關(guān)系,觀察拉莫三嗪(1amotrigine,LTG)對發(fā)育期癲癇大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響。
研究方法:選取6周齡健康雄性SD大鼠,分為生理鹽水對照組(NS組)、癲癇模型組(PTZ組)、拉莫三嗪低劑量組(LTG低劑量組),拉莫三嗪中劑量組(LTG中劑量組)、拉莫三嗪高劑量組(LTG高劑量組),各16只SD大鼠。造模成功后,LTG低、中、高劑量
2、分別組給予LTG5mg·kg-1、25mg·kg-1、50mg·kg-1腹腔注射,模型對照組和正常組予以等體積生理鹽水腹腔注射,每隔24h重復(fù)給等量藥1次,持續(xù)兩周。每日測其重量以調(diào)整用藥劑量。兩周給藥結(jié)束后開始進(jìn)行Morris水迷宮、Y迷宮測試,對照各組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力的差異性。各組大鼠隨機(jī)取8只予以灌注,灌注后取雙側(cè)腦組織,HE染色,光鏡下觀察海馬組織形態(tài)變化,用SABC法行免疫組織化學(xué)染色定性比較各組海馬NMDA受體的表達(dá)情況;
3、各組大鼠隨機(jī)取8只,直接斷頭,取雙側(cè)海馬,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR比較各組海馬組織CaMKⅡ表達(dá)情況。
研究結(jié)果:①與NS組相比,PTZ組和LTG低劑量組大鼠在Morris水迷宮中平均逃避潛伏期延長,目標(biāo)象限停留時(shí)間變短,Y迷宮中達(dá)標(biāo)所需訓(xùn)練次數(shù)增多,24小時(shí)記憶保持率下降,LTG中、高劑量組較PTZ組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力有明顯改善;②與NS組相比,PTZ組和LTG低劑量大鼠海馬有部分神經(jīng)元壞死,LTG中、高劑量組和PTZ組大鼠
4、相比,海馬神經(jīng)元變性、壞死減輕;③與NS組相比,PTZ組和LTG低劑量組大鼠的海馬NMDA受體表達(dá)下降,LTG中、高劑量組和PTZ組大鼠相比,海馬NMDA受體表達(dá)上升;④與NS組相比,PTZ組和LTG低劑量組大鼠的海馬CaMKⅡ表達(dá)下降,LTG中、高劑量組和PTZ組大鼠相比,海馬CaMKⅡ表達(dá)上升。
研究結(jié)論:①癲癇大鼠學(xué)習(xí)記憶功能受損,與大鼠海馬中NMDA受體及CaMKⅡ表達(dá)下降有關(guān);②LTG可改善癲癇大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的
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