卵巢癌裸鼠模型不同時期生長分化因子-15表達的研究.pdf

1、目的:通過建立人卵巢腺癌細胞裸鼠原位模型，觀察不同腫瘤時期的外周血以及腫瘤組織中GDF-15動態(tài)表達規(guī)律，以探討其在卵巢腫瘤診斷中的價值。
　　方法:將人卵巢腺癌細胞(OVCAR-3)細胞株進行細胞復蘇后常規(guī)細胞傳代培養(yǎng)，選擇傳代至第3代時腫瘤細胞作為原位移植模型注射細胞，隨機將48只BALB/c雌性裸鼠中分為3個時間段組（4周、6周、8周組），予以戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后開腹，在左側卵巢外囊膜下（注射器）注射5μL細胞混懸液后關

2、腹，培養(yǎng)觀察。根據(jù)分組情況，分別在第4、6、8周時（腹腔注射戊巴比妥鈉）麻醉3組存活的（12只）模型裸鼠，自心臟取血約1mL后（模型裸鼠）剝離瘤體，進行腫瘤大小測量，采用免疫放射法對第4周，6周，8周外周血漿內(nèi)GDF-15含量進行檢測，同時提取不同時間組腫瘤組織內(nèi)總蛋白采用免疫印跡法(Western blot)檢測4周，6周，8周生長的腫瘤組織內(nèi)GDF-15蛋白表達情況。以外周血GDF-15含量、卵巢腫瘤重量以及造模時間做相關性分析，確

3、定血清GDF-15含量卵巢腫瘤生長時間和重量的相關性。
　　結果:模型組腫瘤生長情況:原位移植成功率為100％，4weeks組、6weeks組、8weeks組腫瘤生長隨時間延長，重量增加明顯，3組間兩兩間比較腫瘤重量差異均有統(tǒng)計學意義(F=151.438，P=0.000;0.000);3個時間組血漿GDF-15含量:第4周與第6周間差異無明顯統(tǒng)計學意義(P=0.207)，而第8周與第4周、第6周比較血漿GDF-15含量明顯增高，差

4、異有統(tǒng)計學意義(F=22.705，P=0.000;0.000)。免疫組化顯示腫瘤組織間質內(nèi)GDF-15免疫陽性反應隨腫瘤生長時間延長而增強，Western blot檢測結果也顯示腫瘤組織內(nèi)GDF-15蛋白表達隨腫瘤生長而表達增強。相關性分析顯示血漿GDF-15含量與腫瘤生長時間和重量增加呈明顯正相關，相關系數(shù)分別為0.720和0.658(P=0.000)。 結論:裸鼠卵巢腫瘤原位移植模型造模成功率高，GDF-15血漿含量以及腫瘤