轉(zhuǎn)中國對蝦抗菌肽基因np3，np5的水稻抗性研究.pdf

1、抗菌肽能通過破壞膜或者代謝途徑，起到防御細(xì)菌，真菌和病毒毒害的作用。本研究將中國對蝦抗菌肽基因np3和np5分別導(dǎo)入粳稻品種愛知旭體內(nèi)，研究是否增強(qiáng)了水稻白葉枯病的抗性。農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化獲得19株np3轉(zhuǎn)基因陽性T0代植株，9株np5轉(zhuǎn)基因陽性T0代植株。T1代各株系農(nóng)藝性狀考查結(jié)果顯示中國對蝦抗菌肽np3和np5基因的表達(dá)對愛知旭無毒性作用，白葉枯病菌小種CR4接種結(jié)果表明np3和np5轉(zhuǎn)基因植株的白葉枯病抗性得到顯著增強(qiáng)。主要結(jié)果如下

2、：
　　1.植物表達(dá)載體nph3和nph5分別轉(zhuǎn)化愛知旭，獲得150株np3 T0轉(zhuǎn)基因苗和145株 np5 T0轉(zhuǎn)基因苗。用引物P3和P5分別對50株np3轉(zhuǎn)基因苗和20株np5轉(zhuǎn)基因苗進(jìn)行PCR檢測，結(jié)果顯示，18株np3轉(zhuǎn)基因植株檢測到420bp的目的條帶，轉(zhuǎn)基因苗陽性率為36％，9株np5轉(zhuǎn)基因苗檢測到310bp的目的條帶，轉(zhuǎn)基因陽性率為45%。
　　2.對T1代轉(zhuǎn)基因株系的單株進(jìn)行PCR檢測，統(tǒng)計分析目的基因在T1

3、代的分離情況，共篩選到6個轉(zhuǎn)基因株系的陽性株和陰性株分離比符合3：1，其中3個為np3轉(zhuǎn)基因株系，3個為np5轉(zhuǎn)基因株系。T1代植株RNA表達(dá)分析結(jié)果說明了兩個基因在RNA水平上得到表達(dá)。
　　3.在試驗基地調(diào)查了各轉(zhuǎn)基因株系的農(nóng)藝性狀，并和對照株系的農(nóng)藝性狀作比較，說明了中國對蝦抗菌肽基因np3和np5在水稻體內(nèi)的表達(dá)沒有對水稻造成不良影響。
　　4.進(jìn)行抗病試驗，接種的轉(zhuǎn)基因植株和對照植株表現(xiàn)出不同程度的抗病和感病情況，