冷凍聯(lián)合多西紫杉醇對激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞(PC3)的體外作用.pdf

1、目的：觀察冷凍（Cryotherapy，Cryo）、多西紫杉醇（Docetaxol，DT）及冷凍聯(lián)合多西紫杉醇對前列腺癌細(xì)胞PC3生長、增殖和抑制作用、細(xì)胞周期的影響。
　　 方法：體外培養(yǎng)前列腺癌PC3細(xì)胞，應(yīng)用光鏡、透射電鏡、四甲基噻唑藍(lán)（MTT）法、流式細(xì)胞儀和免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察1umol/L、0.1umol/L、0.01umol/L多西紫杉醇和-20℃Cryo、-40℃Cryo在體外單一或協(xié)同對前列腺癌細(xì)胞系PC3的生長

2、、凋亡誘導(dǎo)、細(xì)胞DNA含量及Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果：冷凍和多西紫杉醇能引起PC3細(xì)胞產(chǎn)生凋亡形態(tài)學(xué)改變。MTT試驗觀察到自0.01μ mol/L～1μ mol/L，DT對PC3細(xì)胞存活和生長抑制作用逐漸增強(qiáng)，從32.10％～55.4％（P<0.05），呈濃度依賴性。-20℃至-40℃，Cryo對PC3細(xì)胞存活和生長抑制作用逐漸增強(qiáng)，從70.2％～80.5％（P<0.05），呈溫度依賴性。-20℃恒定條件下

3、，DT濃度自0.01μ mol/L-1μmol/L，對PC3細(xì)胞的存活和生長抑制作用增強(qiáng)，從76.9％～89.3％（P<0.05），呈溫度與濃度依賴性。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示經(jīng)0.01μ mol/L～1μmol/L DT作用48小時后，G0/G1期細(xì)胞比例逐漸下降，分別為36.3％、22.0％、17.5％；而G2/M期細(xì)胞比例逐漸升高，分別為52.1％，69.9％，71.9％。-20℃至-40℃，G0/G1期細(xì)胞比例分別為28.1％、23.

4、6％，比例逐漸下降，G2/M期細(xì)胞比例逐漸升高，分別為52.9％，65.8％，呈溫度依賴關(guān)系。在-20℃恒定條件下，DT濃度自0.01μmol/L～1μ mol/L，G0/G1期細(xì)胞比例逐漸下降，分別為25.9％、22.2％、11.0％；而G2/M期細(xì)胞比例逐漸升高，分別為62.9％，70.9％，81.0％。冷凍+化療具有G2/M期阻滯作用，呈溫度及劑量依賴關(guān)系。免疫組化結(jié)果顯示多西紫杉醇藥物濃度自0.01μmol/L～1μ mol/L

5、，Bcl-2蛋白表達(dá)降低從0.19％～0.09％，Bax蛋白表達(dá)增強(qiáng)從0.15％～0.29％，從-20℃至-40℃，Bcl-2蛋白表達(dá)降低從0.13％～0.11％，Bax蛋白表達(dá)增強(qiáng)從0.21％～0.30％（P<0.05）。-20℃恒定條件下，DT濃度自0.01μmol/L～1μ mol/L，Bcl-2蛋白表達(dá)降低從0.10％～0.05％，Bax蛋白表達(dá)增強(qiáng)從0.31％～0.3596。
　　 結(jié)論：冷凍聯(lián)合多西紫杉醇能夠協(xié)同抑制