K-ras基因突變與結(jié)直腸癌生物學(xué)行為的關(guān)系及其臨床意義.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文Kras基因突變與結(jié)直腸癌生物學(xué)行為的關(guān)系及其臨床意義姓名：吳文輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：詹文華20091202I|I山人學(xué)博l：學(xué)位論文Kras毖岡突變與結(jié)直腸癌生物。7i為的關(guān)系及jt臨床意義突變導(dǎo)致其編碼的氨基酸發(fā)牛改變，從而產(chǎn)牛具有致癌活性的p2l蛋白。傳統(tǒng)的基閃突變檢測(cè)方法，大多需要利用瓊脂糖凝膠電泳或聚苯烯凝膠電泳來(lái)分離野牛型DNA分子和突變型DNA分子，操作復(fù)雜，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，需要使用放射性

2、元素或溴化乙錠等有害物質(zhì)，且不符合自動(dòng)化分析的要求，具有一定的局限性。本研究分三部分，第一部分采用近年發(fā)腱起來(lái)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR和基因測(cè)序技術(shù)檢測(cè)結(jié)直腸癌組織中Kras基因的第12和第l3密碼子突變情況，探討Kras基因突變與結(jié)直腸癌生物學(xué)行為的關(guān)系。第二二部分采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和基因測(cè)序技術(shù)檢測(cè)結(jié)直腸癌患者門(mén)靜脈血液中K—ras基因突變情況，明確結(jié)直腸癌患者門(mén)靜脈血液、肝轉(zhuǎn)移灶足否和腫瘤組織一樣，存在著Kras基因的突變，揭示K

3、raS突變與結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的關(guān)系。第三部分在前兩部分研究的基礎(chǔ)上，聯(lián)合檢測(cè)腫瘤組織中Kras基因突變情況和患者血清CEA水平，探討二者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)作用。第一部分Kra$基因突變與結(jié)直腸癌生物學(xué)行為的關(guān)系l摘要】研究目的：觀察結(jié)直腸癌組織中K—ras基因突變情況，探討K—ras基因突變與結(jié)直腸癌生物學(xué)行為的關(guān)系。研究方法：采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)方法和基因測(cè)序技術(shù)檢測(cè)123例結(jié)直腸癌組織中kras基因l號(hào)外顯子12、

4、13密碼子突變情況，結(jié)合其臨床病理資料分析。研究結(jié)果：123例結(jié)直腸癌組織中k—ras基因突變者53例(408％)，其中12密碼子突變42例(341％)，13密碼子突變者ll例(89％)。基因突變率與患者年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤侵潤(rùn)深度、分化程度無(wú)明顯相關(guān)性，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝臟轉(zhuǎn)移及TNM分期有相關(guān)性(P005)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者k—ras基因突變率(638％)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(303％)，有肝臟轉(zhuǎn)移者基因突變率(688％)明顯高