K-ras基因突變狀態(tài)與結(jié)直腸癌生物學(xué)行為關(guān)系及與FOLFOX不良反應(yīng)的相關(guān)性分析.pdf

1、在中國(guó)結(jié)直腸癌(colorectai canceq CRC)是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在惡性腫瘤中的發(fā)病率位居第4位。近年來(lái)，結(jié)直腸癌的發(fā)病率逐漸增高，具有年輕化趨勢(shì)，是腫瘤相關(guān)死亡原因的第二大原因。
　　手術(shù)治療是結(jié)直腸癌最有效的治療手段，化療和放療則是對(duì)手術(shù)治療的一個(gè)有益的補(bǔ)充。由于僅有70％的結(jié)直腸癌患者確診時(shí)可以行根治性切除，而且約40％的Ⅱ、Ⅲ期患者可產(chǎn)生術(shù)后復(fù)發(fā)，因而化療對(duì)于這部分患者起著非常重要的作用。5-FU是過(guò)去幾十

2、年中結(jié)直腸癌化療的主要藥物，近年來(lái)，隨著伊立替康、奧沙利鉑等新藥的出現(xiàn)，晚期結(jié)直腸癌患者的生存率明顯提高。
　　大量實(shí)驗(yàn)表明，多個(gè)癌基因的激活或抑癌基因的失活與結(jié)直腸癌的發(fā)生有關(guān)，Ras癌基因便是其中之一。Ras癌基因家族由K-ras、H-ras和N-ras三個(gè)密切相關(guān)的成員組成，并且絕大多數(shù)的點(diǎn)突變產(chǎn)生在其1號(hào)外顯子的第12和第13密碼子上。三個(gè)基因中，K-ras基因狀態(tài)可以用來(lái)預(yù)測(cè)靶向藥物抗EGFR抗體的療效，是結(jié)直腸癌患者進(jìn)

3、行靶向治療方案選擇的重要指標(biāo)之一。《2013(NCCN)結(jié)腸癌臨床實(shí)踐指南》指出，采用靶向治療前應(yīng)當(dāng)對(duì)患者進(jìn)行K-ras基因突變檢測(cè)。
　　K-ras基因突變能否預(yù)測(cè)常規(guī)化療的化療效果及預(yù)后，尚缺乏預(yù)見(jiàn)性的指標(biāo)，目前無(wú)一致定論。因此，本課題從分子水平上揭示結(jié)直腸癌K-ras基因的變化，揭示K-ras基因的生物學(xué)行為，并揭示K-ras基因突變與FOLFOX化療的不良反應(yīng)的相關(guān)性，探討K-ras基因突變能否預(yù)測(cè)常規(guī)化療的不良反應(yīng)。

4、r>　　目的:
　　本課題通過(guò)熒光定量PCR法與直接測(cè)序法分別檢測(cè)結(jié)直腸癌K-ras基因突變，對(duì)比熒光定量PCR方法與直接測(cè)序法優(yōu)越性;探討K-ras基因突變與結(jié)直腸癌生物學(xué)行為的關(guān)系;K-ras基因突變狀態(tài)是否能夠預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌FOLFOX化療的不良反應(yīng)。
　　方法:
　　選取山東省腫瘤醫(yī)院2011年12月1日至2012年10月31日結(jié)直腸癌行手術(shù)治療患者200例，包括患者一般情況（年齡、性別等），術(shù)后明確病理診斷，術(shù)

5、后根據(jù)病情選擇進(jìn)行FOLFOX方案化療，均未接受抗EGFR抗體治療。每化療一個(gè)周期結(jié)束后對(duì)患者進(jìn)行KPS評(píng)分，不良反應(yīng)按WHO推薦抗癌藥物常見(jiàn)不良反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，并將具體情況進(jìn)行記錄。試驗(yàn)將手術(shù)中切出的病理組織進(jìn)行基因測(cè)序，分別采用熒光PCR檢測(cè)法與直接檢測(cè)法，比較兩種測(cè)序方法的結(jié)果，分析結(jié)直腸癌K-ras基因突變狀態(tài)的生物學(xué)行為，結(jié)直腸癌K-ras基因突變狀態(tài)與FOLFOX化療不良反應(yīng)的相關(guān)性分析。本試驗(yàn)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)

6、學(xué)軟件進(jìn)行X2檢驗(yàn)，分析不同結(jié)直腸癌K-ras基因狀態(tài)與腫瘤大小、分化程度、浸潤(rùn)深度、TNM分期、CEA水平的關(guān)系，探索FOLFOX化療不良反應(yīng)是否與不同結(jié)直腸癌K-ras基因狀態(tài)存在相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　200例結(jié)直腸癌組織中K-ras基因突變者73例(73/200，36.5％)，其中12密碼子突變52例(52/200，26％)，13密碼子突變者21例(21/200，10.5％)。
　　K-ras基因突變率在不同

7、年齡段（＜50歲和＞50歲）、不同性別的患者中的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;不同腫瘤大小、部位、腫瘤細(xì)胞的分化程度及腫瘤浸潤(rùn)深度的K-ras基因突變率無(wú)明顯差異(P＞0.05);不同TNM分期的K-ras基因突變率有明顯差異，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　118例結(jié)直腸癌患者接受FOLFOX方案化療共1002例?；熞鸬牟涣挤磻?yīng)主要表現(xiàn)為:Ⅰ～Ⅱ度的胃腸道反應(yīng)、感覺(jué)神經(jīng)異常、骨髓抑制及肝功能異常等癥狀，化療間隙期可恢復(fù)。全部

8、患者均未出現(xiàn)腎臟及心臟毒性，未發(fā)生因嚴(yán)重不良反應(yīng)延遲或停止化療。K-ras基因狀態(tài)與結(jié)直腸癌術(shù)后輔助化療FOLFOX的不良反應(yīng)無(wú)明顯相關(guān)性(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.實(shí)驗(yàn)證明在結(jié)直腸癌組織中存在K-ras基因的點(diǎn)突變，突變率為36.5％;突變主要發(fā)生于12密碼子，突變的主要類型:12密碼子的第二個(gè)G突變?yōu)門或突變?yōu)锳;
　　2.不同腫瘤大小、部位、分化程度及浸潤(rùn)深度，K-ras基因突變率無(wú)明顯差異(P＞0.

9、05)，不同TNM分期的K-ras基因突變率有明顯差異，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); K-ras基因的突變可能賦予腫瘤一定的浸潤(rùn)性，使腫瘤具有轉(zhuǎn)移傾向。
　　3.K-ras基因不同突變狀態(tài)在結(jié)直腸癌FOLFOX化療，其不良反應(yīng)無(wú)明顯差異;結(jié)直腸癌K-ras基因的突變狀態(tài)不能預(yù)測(cè)患者的化療反應(yīng)。
　　因此，K-ras基因突變可作為一個(gè)分子標(biāo)記，可作為判斷結(jié)直腸癌惡性程度和是否有轉(zhuǎn)移傾向的重要指標(biāo);尚不能預(yù)測(cè)患者化療的