梓醇對阿爾茨海默病的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的:觀察梓醇對APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病(Alzheimer'sDisease，AD)模型鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力和自主活動(dòng)的影響以及腦內(nèi)老年斑的產(chǎn)生、神經(jīng)元丟失等典型病理特征的影響，并探討梓醇發(fā)揮作用的相關(guān)機(jī)制，為AD的防治提供新的思路。
　　 方法:將3月齡的APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為梓醇治療組和生理鹽水對照組，每組20只，并以10只同月齡的具有相同遺傳背景的C57小鼠作為正常對照，用梓醇(每天5

2、mg/kg)和等量生理鹽水腹腔注射AD模型小鼠3周，應(yīng)用Morris水迷宮、曠場實(shí)驗(yàn)和高架十字迷宮(elevated plus maze，EPM)檢測小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力、自主活動(dòng)和焦慮情緒的變化;應(yīng)用免疫組織化學(xué)檢測各組小鼠腦內(nèi)老年斑與神經(jīng)元數(shù)量等的變化;通過Western blot檢測梓醇對小鼠腦內(nèi)β分泌酶活性及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)等的影響。
　　 結(jié)果:(1)行為學(xué)結(jié)果顯示:①在Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中，3組小鼠在

3、可視平臺中找到平臺的平均潛伏期和搜索的平均路徑無明顯差異(P＞0.05);隱蔽平臺實(shí)驗(yàn)中，梓醇治療組小鼠找到平臺的平均時(shí)間與搜索的平均距離較生理鹽水對照組小鼠明顯縮短(P＜0.01)，與正常對照組比較，無明顯差異(P＞0.05);在探索實(shí)驗(yàn)中，60s內(nèi)梓醇治療組小鼠穿越平臺次數(shù)明顯高于生理鹽水對照組(P＜0.01);②在曠場實(shí)驗(yàn)中，梓醇治療組小鼠在中央?yún)^(qū)域停留的時(shí)間和路程顯著低于生理鹽水對照組(P＜0.01);③在高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中，3

4、組小鼠在總的穿臂次數(shù)和時(shí)間上沒有顯著差別(P＞0.05)，梓醇治療組小鼠穿越開臂的次數(shù)和停留在開臂上的時(shí)間要顯著的高于生理鹽水對照組(P＜0.01)，而與正常對照組相比，無顯著差異(P＞0.05)。(2)形態(tài)學(xué)檢測結(jié)果:免疫組化的結(jié)果分析顯示，與生理鹽水對照組相比，梓醇對照組小鼠大腦皮質(zhì)和海馬區(qū)域老年斑數(shù)量明顯減少(P＜0.01)，神經(jīng)元、神經(jīng)元前體細(xì)胞以及血管數(shù)量明顯增多，凋亡細(xì)胞顯著減少。(3)蛋白水平測定結(jié)果:Western bl

5、ot結(jié)果顯示，與生理鹽水對照組相比，梓醇治療組小鼠腦組織中APP全蛋白的表達(dá)無明顯變化，BACE1的表達(dá)顯著減少(P＜0.01)，同時(shí)突觸相關(guān)蛋白PSD95蛋白與血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)顯著增多(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:梓醇可顯著提高APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力，緩解其焦慮情緒與自主活動(dòng);梓醇可顯著減少APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)Aβ的沉積與老年斑的數(shù)量，可能是通過抑制APP代謝過程中BACE1