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文檔簡(jiǎn)介
1、湖羊是優(yōu)質(zhì)的地方綿羊品種,在杭嘉湖地區(qū)有悠久的飼養(yǎng)歷史,但長(zhǎng)期以來對(duì)其肉質(zhì)及其肉用性能缺乏系統(tǒng)全面的研究。為了有效開發(fā)利用這一優(yōu)質(zhì)資源,本研究進(jìn)行了如下三部分試驗(yàn)。首先是對(duì)湖羊肉質(zhì)分析研究,以不同年齡湖羊?yàn)檠芯繉?duì)象進(jìn)行羊肉常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分、脂肪酸組成以及風(fēng)味物質(zhì)分析。第二,在肉質(zhì)分析研究基礎(chǔ)上研究日糧多不飽和脂肪酸及VE對(duì)湖羊肉質(zhì)、肌肉脂肪酸組成的影響;對(duì)血清生化指標(biāo)、血清和肝臟抗氧化酶活性等的影響,從生理、生化層面分析日糧對(duì)羊肉脂肪酸的作
2、用機(jī)理。第三,通過克隆乙酰輔酶A羧化酶(ACC)和硬脂酰輔酶A脫氫酶(SCD)基因,并分析這兩個(gè)酶基因mRNA在肝臟、皮下脂肪、肌肉三種不同組織中表達(dá)的變化,試圖從分子生物學(xué)層面分析研究日糧調(diào)控羊肉脂肪酸的某些機(jī)理。
第一部分:湖羊肉質(zhì)研究
選取5月齡、10月齡、18月齡及4歲湖羊各10只,屠宰后取背最長(zhǎng)肌和肱三頭肌分析常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分;取10月齡湖羊背最長(zhǎng)肌分析氨基酸;取肱三頭肌和后背皮下脂肪分析脂肪酸;取肱三
3、頭肌測(cè)風(fēng)味物質(zhì)。結(jié)果顯示,湖羊肌肉水分含量隨年齡增長(zhǎng)而降低(P<0.05),平均水分含量68.9%~74.2%,而粗蛋白(20.3%~24.0%)、粗脂肪(4.1%~6.2%)、粗灰分(1.1%~1.4%)的含量隨年齡增長(zhǎng)而增加(P<0.05),說明湖羊的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分隨年齡變化符合動(dòng)物的一般變化規(guī)律。湖羊肌肉蛋白質(zhì)中8種必需氨基酸組成全面,與FAO模式比較,各種氨基酸評(píng)分均接近或大于1。湖羊肌肉和皮下脂肪組織的脂肪酸中油酸(C18:1)
4、、棕櫚酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0)3種脂肪酸含量最高,占總脂肪酸比例在74.2%~79.7%之間;兩種脂肪組織的短鏈、中鏈和長(zhǎng)鏈脂肪酸含量分別為0.2%~0.5%,4%和95%左右。肌間脂肪的飽和脂肪酸(SFA)、單不飽脂肪酸(MUFA)和多不飽和脂肪酸(PUFA)含量分別為44.2%~45.1%,45.7%~46.9%和8.2%~10.1%,皮下脂肪比肌間脂肪含較高的SFA和較低的MUFA和與PUFA。2種組織脂肪酸的PUF
5、A與SFA比值(P/S)為0.13~0.23;PUFA中n-6/n-3為0.64~1.46。從本試驗(yàn)的4個(gè)年齡看,脂肪酸組成以10月齡為最優(yōu)。湖羊肌肉脂肪中檢測(cè)到的70種揮發(fā)性風(fēng)味化合物,包括14種酸、7種酮、9種醛、5種醇、10種酯類、13種烴、12種其它化合物(包括呋喃、吡嗪、吡啶、吲哚等含氮硫氧等雜環(huán)化合物)。其中酯類含量最高,占肉中總風(fēng)味物24.1%~28.3%,其次為烴和酸,分別占20.5%~21.2%和19.0%~20.0%
6、。在本試驗(yàn)條件下,結(jié)合對(duì)有關(guān)報(bào)道的參考,3-甲基丁醛、苯硫酚、支鏈脂肪酸、3-甲基吲哚、2,3-辛二酮等物質(zhì)均有可能跟湖羊肌肉的特征性風(fēng)味有關(guān)。
第二部分:飼養(yǎng)試驗(yàn)
選取45日齡斷奶湖羊公羔40頭,平均初始體重12.75 Kg,按體重隨機(jī)平均分成五組,(1)對(duì)照組,(2)3%豆油組,(3)3%豆油加500mg/kg VE組,(4)3%玉米油組,(5)3%玉米油加500mg/kg VE組。日糧精粗比為40:60
7、(DM),且為等能、等氮,動(dòng)物接近自由采食,但在組間控制采食量基本相同,以減少因采食和增重差異造成的肉質(zhì)差異,飼養(yǎng)試驗(yàn)為期12周,預(yù)試期2周,正試期10周。試驗(yàn)結(jié)束后所有動(dòng)物屠宰,測(cè)定生產(chǎn)性能和肉質(zhì)指標(biāo):取血清和肝臟分析血液生化指標(biāo)和抗氧化酶;取背最長(zhǎng)肌分析脂肪酸組成。日糧添加植物油和VE對(duì)湖羊生產(chǎn)性能和和肉質(zhì)沒有顯著影響。血清總蛋白、白蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白、膽固醇在各組之間差異不顯著;添加植物油使血清總膽固醇、高密度脂蛋白膽固
8、醇、尿素氮、游離脂肪酸顯著增高,葡萄糖顯著降低;VE對(duì)血清生化指標(biāo)沒有進(jìn)一步的顯著影響。添加植物油使湖羊背最長(zhǎng)肌中PUFA、MUFA含量升高,SFA降低;C8:0,C14:0和C15:0等中、短長(zhǎng)度碳鏈脂肪酸含量降低;使肌間脂肪trans-ll C18:1(trans vaccenic acid,TVA)和cis9 trans11共軛亞油酸( CLA)及總CLA含量增加。在添加植物油基礎(chǔ)上再加VE,可進(jìn)一步影響肌肉脂肪酸的組成,使PUF
9、A、MUFA、TVA、cis9 trans llCLA及總CLA含量比單純添加植物油組顯著增加,而SFA、C8:0,C14:0和C15:0等脂肪酸顯著降低。添加植物油和VE對(duì)C18:2和C18:3含量與對(duì)照組比沒有變化。添加豆油或玉米油使血清和肝臟超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性提高,而過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量下降,說明抗氧化能力提高;添加VE使各種抗氧化酶活性和MDA含量比單
10、純添加植物油組均有顯著下降,但與對(duì)照組相比除肝臟SOD活性降低和血清GSH-Px活性升高外,其它酶活性均沒有顯著差異,說明脂質(zhì)被氧化的機(jī)會(huì)進(jìn)一步的下降,也即機(jī)體抗氧化的能力進(jìn)一步增加。正是由于添加植物油和VE具有提高機(jī)體抗氧化能力的作用,從而使飼養(yǎng)試驗(yàn)四個(gè)處理組脂肪酸中的PUFA、MUFA含量比對(duì)照組升高而SFA相對(duì)含量降低,使P/S升高。
第三部分:乙酰輔酶A羧化酶(ACC)和硬脂酰輔酶A脫氫酶(SCD)基因克隆及mRN
11、A表達(dá)
取飼養(yǎng)試驗(yàn)動(dòng)物的肌肉、皮下脂肪及肝臟用于ACC和SCD基因克隆及其酶mRNA表達(dá)分析。添加豆油或玉米油顯著抑制了三種組織的SCD酶基因mANA的表達(dá),對(duì)皮下脂肪和肝臟組織的ACC酶基因mANA的表達(dá)也起到顯著的抑制作用,而肌肉組織ACC酶基因mANA的表達(dá)雖然也被抑制,但與對(duì)照比差異不顯著。添加植物油同時(shí)再添加VE,對(duì)兩種基因mANA表達(dá)的抑制作用與單純添加植物油相同,VE對(duì)對(duì)兩種基因的表達(dá)沒有進(jìn)一步的影響作用。添
12、加植物油使ACC酶mRNA受抑制,導(dǎo)致飼養(yǎng)試驗(yàn)各試驗(yàn)組動(dòng)物肌肉肌間脂肪含量比對(duì)照組略有下降,中、短碳鏈脂肪酸含量降低。添加植物油使內(nèi)源合成CLA的底物TVA的含量增加,增加了CLA合成的可能性,同時(shí)對(duì)SCD表達(dá)的抑制作用,減少了TVA向CLA的轉(zhuǎn)變,但總體日糧不飽和脂肪酸提供的底物效應(yīng)高于酶基因表達(dá)的抑制作用,所以最終效果是導(dǎo)致CLA增加,但提高的絕對(duì)幅度有限。
綜上所述,湖羊肌肉蛋白質(zhì)含量高,必需氨基酸組成全面,賴氨酸含
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