2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、眾所周知,惡性腫瘤已成為我國居民的首要死因,占死亡原因20%以上。并且每年還在以驚人的速度增長。而腫瘤在侵襲和轉(zhuǎn)移之前的起始階段,若能被早期發(fā)現(xiàn),及早治療,就可以大大提高腫瘤的治愈率,降低患者病死率。而在目前腫瘤的早期診斷中,腫瘤標(biāo)志物的檢測正日益成為臨床檢測中常用的檢測手段之一。
   而作為真核細(xì)胞蛋白翻譯后修飾中的一個最主要的形式,幾乎所有涉及細(xì)胞識別、粘附、遷移、凋亡等細(xì)胞生理活動以及分化、發(fā)育、免疫應(yīng)答等重要生命活動的

2、膜蛋白和分泌蛋白表達(dá)后均伴有糖基化的發(fā)生。并且科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)很多腫瘤細(xì)胞的表面糖基化相對于正常細(xì)胞都發(fā)生了明顯的改變,而細(xì)胞表面糖基化的差異在一定程度上反映了細(xì)胞內(nèi)在的生理狀態(tài)。因此,腫瘤細(xì)胞表面糖基化的變化可以成為預(yù)測腫瘤細(xì)胞的類型,惡化程度及轉(zhuǎn)移傾向的線索。在本文中我們嘗試?yán)媚匦酒@個高通量,譜系化的研究手段對腫瘤細(xì)胞的表面糖結(jié)構(gòu)進(jìn)行篩查,期待找到一些能與腫瘤細(xì)胞分類以及轉(zhuǎn)移,惡化相關(guān)聯(lián)的糖標(biāo)志物。
   本文分為四部分

3、,主要圍繞著凝集素芯片在檢測活細(xì)胞表面糖譜變化中的應(yīng)用來展開。我們從凝集素芯片的構(gòu)建入手,到以白血病細(xì)胞分型為目標(biāo)的原理驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),最終以不同轉(zhuǎn)移能力的乳腺癌細(xì)胞為對象,建立了一套以凝集素芯片為基礎(chǔ),整合了凝集素親和、質(zhì)譜以及其他相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的整體化實(shí)驗(yàn)方案并成功的鑒定出了與乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移相關(guān)的膜糖蛋白以及下游效應(yīng)網(wǎng)絡(luò)。本文的主要結(jié)構(gòu)如下:
   在第一章中,我們首先介紹了本文的技術(shù)核心——凝集素芯片技術(shù)及其在分析活細(xì)胞表面糖結(jié)構(gòu)

4、方面的優(yōu)勢。這章主要從天然凝集素的結(jié)構(gòu)功能;凝集素芯片的制作工藝,檢測方法和目前應(yīng)用這幾部分進(jìn)行敘述,詳細(xì)地介紹了凝集素芯片技術(shù)這一新興的高通量糖結(jié)構(gòu)檢測技術(shù)對活細(xì)胞表面糖譜研究的重要性。
   在第二章中,我們以急性髓系白血病細(xì)胞分型為目的,對凝集素芯片在腫瘤細(xì)胞糖譜分析中的應(yīng)用做了原理性驗(yàn)證。我們從基片選擇,流程優(yōu)化及結(jié)果分析等幾方面詳細(xì)敘述了以凝集素芯片為檢測手段,以活體腫瘤細(xì)胞為檢驗(yàn)對象,進(jìn)行細(xì)胞表面糖譜系分析的方法。最

5、終,我們成功地從91個凝集素中找到了22個凝集素可以有效地區(qū)分四種白血病細(xì)胞,說明了本方法在檢測活體腫瘤細(xì)胞表面糖譜的可行性。并且我們還嘗試了用長期凍存的白血病細(xì)胞樣本來做凝集素芯片分析,結(jié)果證明,在現(xiàn)行的細(xì)胞凍存條件下,保存了2個月的樣本可以用作凝集素芯片分析,為日后凝集素芯片在臨床方面的應(yīng)用做了有益的探索。
   本次報告的核心內(nèi)容在第三章。在這章中我們建立了一套整合了凝集素芯片技術(shù),質(zhì)譜技術(shù)這兩項(xiàng)高通量檢測技術(shù),并輔以穩(wěn)定

6、同位素標(biāo)記技術(shù),凝集素親和技術(shù),實(shí)時細(xì)胞檢測技術(shù)等幾項(xiàng)關(guān)鍵的相關(guān)技術(shù)的整體化解決方案,用以檢測和分析腫瘤細(xì)胞表面差異化表達(dá)的糖結(jié)構(gòu)或糖蛋白。我們以不同轉(zhuǎn)移能力的三陰性乳腺癌細(xì)胞系為檢測對象,首先利用凝集素芯片找到了與之差異性結(jié)合的凝集素——RCA-I,并通過凝集素富集和穩(wěn)定同位素標(biāo)記最終找到了KRT8和POTEG/H這兩個在這些細(xì)胞表面差異性糖基化的膜蛋白及其下游分別相關(guān)的中間纖維蛋白和微絲蛋白這兩個與細(xì)胞運(yùn)動高度相關(guān)的細(xì)胞骨架網(wǎng)絡(luò)。<

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