2型糖尿病足潰瘍患者前列環(huán)素、前列環(huán)素合成酶的變化及其臨床意義.pdf

1、糖尿病足是發(fā)生于糖尿病患者的足和下肢的一種病理狀態(tài)，這種狀態(tài)可以伴發(fā)感染、導(dǎo)致殘廢和截肢。糖尿病足最常見的是潰瘍和壞疽。潰瘍可以深淺不等，伴有或不伴有感染。 糖尿病足潰瘍與壞疽是糖尿病患者致殘致死的重要原因，是許多國家非外傷截肢的首要原因。西方國家中，5%-10%的糖尿病患者有不同程度的足潰瘍，截肢率為1%。糖尿病患者的截肢率是非糖尿病患者的15倍。糖尿病足使患者的生活質(zhì)量嚴(yán)重下降，而且治療相當(dāng)困難，治療周期長，醫(yī)療費用高，給患

2、者和社會帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。 DFU病因?qū)W上可以是神經(jīng)性的和/或缺血性的。這兩種因素往往同時存在。特別是缺血性因素，一旦存在，在很大程度上影響了患肢的供血、供氧，不僅導(dǎo)致潰瘍的愈合困難，而且使致殘、致死率顯著增高，而缺血性因素的病理基礎(chǔ)是下肢動脈血管硬化，循環(huán)舒縮功能異常，血小板凝聚增加，凝血異常而形成血栓等。 DFU患者下肢動脈硬化與血管內(nèi)皮功能障礙有密切關(guān)系，而前列環(huán)素是血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)合成、分泌的主要血管活性物質(zhì)，約占

3、血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)物的66%，而且PGI2是迄今發(fā)現(xiàn)的作用最強的內(nèi)源性血小板抑制劑，并有較強的舒張血管作用。雖然有不少文章研究糖尿病患者PGI2及其酶的改變，但其對DFU的影響報道較少，DFU缺血性改變是否伴隨全身性PGI2水平改變還是單純是下肢局部PGI2水平的改變，目前尚不明確。 目的： 通過血漿PGI2的代謝產(chǎn)物及其相關(guān)影響因子的的檢測及分析，探討PGI2水平改變對2型糖尿病患者發(fā)生DFU的預(yù)測價值，及對T2DFU的治

4、療效果、預(yù)后的評估價值。 通過研究患者肌肉組織中PGI2及前列環(huán)素合成酶活性的改變，了解T2DFU患者病變局部PGI2及PGIS情況，更深入地分析其對T2DFU的影響，為T2DFU的防治提供臨床方案和依據(jù)，有效減少因糖尿病足潰瘍造成的致殘及死亡。 對象與方法： 一、研究對象 第一部分：PGI2的代謝產(chǎn)物6-keto-PGF1a檢測與分析 1 T2DFU組：選擇我院2007年6月至2008年11月住

5、院確診的2型糖尿病并糖尿病足潰瘍患者共60例，年齡（56±8.13）歲。按照Wagner診斷分級標(biāo)準(zhǔn)分為：Ⅰ級7例，Ⅱ級13例，Ⅲ級14例，Ⅳ級18例，Ⅴ級8例。將患者分為T2DFU壞疽組和T2DFU非壞疽組。即T2DFU壞疽組26例，T2DFU非壞疽組34例。 2對照組：選擇同期在我院健康體檢者35例，年齡（55±7.82）歲。 第二部分：PGIS的免疫組化學(xué)檢測與分析 1 T2DFU截肢組：在第一部分實驗的T

6、2DFU壞疽組中隨機選擇10例曾做截肢手術(shù)患者，年齡（57±9.54）歲。每例患者分別留取潰瘍邊緣及截肢手術(shù)切口附近帶血管肌肉組織各一份，即分為T2DFU邊緣組及T2DFU遠(yuǎn)端組； 2 對照組：非糖尿病外傷截肢組：選擇同期在我院住院非糖尿病因外傷截肢患者10例，年齡（55±8.28）歲。每例留取截肢手術(shù)切口附近帶血管肌肉組織各一份。 2型糖尿病診斷需符合1999WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)，所有研究對象均無血液系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤等嚴(yán)重

7、疾病，肝腎功能正常，且兩周內(nèi)未曾服用過阿司匹林、消炎痛等影響前列腺素合成藥物或血管擴張劑、未接受過胰島素治療。 二、研究方法 第一部分：PGI2的代謝產(chǎn)物6-keto-PGF1a檢測與分析 1 記錄并分析60例T2DFU患者及10例因外傷截肢非糖尿病患者入院時、35例健康體檢者體檢時的臨床資料及實驗室指標(biāo)，包括：性別、年齡、病程、體質(zhì)指數(shù)、入院時血壓、空腹血糖、餐后2小時血糖、空腹胰島素、餐后2小時胰島素、糖化血

8、紅蛋白、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、血肌酐、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶等。 2 血漿及勻漿上清液6-keto-PGF1a的測定 1）采用放射免疫分析方法測定60例T2DFU患者及10例因外傷截肢非糖尿病患者入院時、35例健康體檢者體檢時的血漿前列環(huán)素的穩(wěn)定代謝產(chǎn)物6-酮-前列腺素F1a的濃度，作各組間比較并與各因素作相關(guān)分析。 2）采用RIA法測定T2DFU邊緣組、T2DFU遠(yuǎn)端組肌肉

9、組織及對照組肌肉組織勻漿上清液中6-keto-PGF1a的濃度，并作各組間比較。 3彩超檢測60例T2DFU患者入院時與35例健康體檢者的雙下肢血管情況，采用踝肱指數(shù)測定；彩超測定血管內(nèi)皮功能，采用內(nèi)皮依賴性舒張功能測定，作各組間比較并與血漿ln作相關(guān)分析。 第二部分：PGIS的免疫組化學(xué)檢測與分析 采用免疫組化方法測定T2DFU邊緣組、T2DFU遠(yuǎn)端組肌肉組織及對照組肌肉組織中PGIS的表達及血管密度情況，作各

10、組間比較及與組織勻漿上清液ln的相關(guān)分析。 結(jié)果： 第一部分：PGI2的代謝產(chǎn)物6-keto-PGF1a檢測與分析 （一）臨床資料在T2DFU壞疽組及非壞疽組與健康對照組三組中的比較： 1.三組在性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)、入院時收縮壓及舒張壓上的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）； 2.T2DFU兩組（壞疽組與非壞疽組）分別與對照組比較：TG、TC、LDL-C、HbAIC、FPG、2hPG、ln的水平

11、明顯上升，HDL-C和血漿ln的水平明顯下降，均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）；非壞疽組的ln（FINS）、ln（2hPINS）水平較對照組升高，且有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）； 3.T2DFU兩組間比較：壞疽組的糖尿病病程（Duration of DM）、TG、FPG、2hPG、HbA1C均高于非壞疽組，壞疽組的血漿ln（6-keto-PGF1a）低于非壞疽組，且有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）；兩組間的

12、TC、HDL-C、LDL-C、ln（FINS）、ln（2hPINS）、ln（HOMA-IR）水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）； （二）不同嚴(yán)重程度的T2DFU患者血漿ln（6-keto-PGFla）的比較：隨著T2DFU嚴(yán)重程度增加，其血漿ln（6-keto-PGF1a）逐漸下降（P<0.05）； （三）血漿ln（6-keto-PGF1a）與各因素的相關(guān)分析：血漿ln（6-keto-PGF1a）與性別、BMI、SBP

13、、DBP、TC、HDL-C、LDL-C無相關(guān)性（P>0.05）；血漿ln（6-keto-PGF1a）與年齡、糖尿病病程（Course of DM）、TG、FPG、2hPG、HbAIC、ln（FINS）、ln（2h PINS）、ln（HOMA-IR）呈負(fù)相關(guān)，且有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）。； （四）彩超檢測雙下肢血管情況及血管內(nèi)皮功能情況在T2DFU壞疽組及非壞疽組與健康對照組三組中比較及與血漿ln（6-keto-

14、PGF1a）的相關(guān)分析： 1.T2DFU非壞疽組及壞疽組ABI均較對照組顯著性降低，有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05、P<0.01），DFU壞疽組ABI較非壞疽組顯著性降低，并有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）； 2.T2DFU兩組EDD均較對照組降低，有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；T2DFU壞疽組EDD較非壞疽組降低，并有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）； 3.血漿ln（6-keto-PGF1a）與ABI呈顯著正相關(guān)（r=0.8

15、26，P<0.05）；血漿ln（6-keto-PGF1a）與EDD呈顯著正相關(guān)（r=0.895，P<0.01）。 （五）T2DFU邊緣組及遠(yuǎn)端組組織勻漿上清液ln（6-keto-PGF1a）較對照組均有降低，且有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），T2DFU邊緣組較T2DFU遠(yuǎn)端組亦有降低且有統(tǒng)計學(xué)意義：（P<0.05）； 第二部分：PGIS的免疫組化學(xué)檢測與分析 （一）三組截肢患者肌肉組織血管內(nèi)皮細(xì)胞PGIS表達強度比

16、較（用灰度值Grey定量檢測）及與ln（6-keto-PGF1a）的相關(guān)分析： 1.T2DFU邊緣組及遠(yuǎn)端組與對照組比較，Grey均明顯升高，即PGIS表達強度明顯減弱，且有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01、P<0.05）；T2DFU邊緣組與T2DFU遠(yuǎn)端組比較，Grey明顯升高，即PGIS表達強度明顯減弱，且有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）； 2.T2DFU邊緣組、T2DFU遠(yuǎn)端組及對照組PGIS表達強度（用免疫組化切片中灰度值G

17、rey定量檢測）與其組織勻漿上清液ln（6-keto-PGF1a）呈顯著性正相關(guān)（r=0.648，P<0.05）。 （二）三組截肢患者肌肉組織中血管密度（VD）比較： T2DFU邊緣組及遠(yuǎn)端組與對照組比較，VD均明顯降低，且有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01、P<0.05）；T2DFU邊緣組與T2DFU遠(yuǎn)端組比較，VD明顯降低，且有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論： 2型糖尿病足潰瘍患者血漿及局部PGI2水平