杭白菊指紋圖譜及其主要黃酮苷成分分析.pdf

1、中藥指紋圖譜技術(shù)源于指紋鑒定學(xué)。通常是指狹義的表達(dá)植物藥物代謝產(chǎn)物化學(xué)特征的指紋圖譜，即中藥化學(xué)(成分)指紋圖譜，含中藥材(原料藥材)指紋圖譜；中藥原料藥(包括飲片、配伍顆粒)指紋圖譜和中藥制劑指紋圖譜，是中藥生產(chǎn)質(zhì)量的一種新型標(biāo)準(zhǔn)，被用來(lái)鑒別原藥材以及控制原料藥與制劑的質(zhì)量，因?yàn)橹兴幉牡牟煌N類(lèi)、不同生長(zhǎng)環(huán)境、不同的采摘時(shí)間和不同貯存條件等都能引起原藥材的化學(xué)成分及含量的變化，同時(shí)藥品生產(chǎn)過(guò)程中由于生產(chǎn)工藝的不穩(wěn)定也可能引入一些其他成

2、分，所以指紋圖譜技術(shù)可用來(lái)評(píng)價(jià)原料藥材、半成品以及成品質(zhì)量的均一性和穩(wěn)定性，它突破了傳統(tǒng)的質(zhì)控技術(shù)單一、不穩(wěn)定等缺陷，確保了中藥的一致性，療效的安全性及可靠性，是組分群體的特征圖譜，全面反映了中藥所含化學(xué)成分的種類(lèi)與數(shù)量，進(jìn)而反映中藥材及產(chǎn)品的質(zhì)量，獲得了越來(lái)越多的重視。中藥注射劑必須制定藥材及制劑的指紋圖譜。世界衛(wèi)生組織(WHO)在1996年草藥評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則中也規(guī)定：如果草藥的活性成分不明，可以提供色譜指紋圖譜以證明產(chǎn)品質(zhì)量的一致。

3、 杭白菊(FlosChrysanthemi)，為菊科植物菊的干燥頭狀花序，具有“清熱散風(fēng)、平肝明目”之功效。含木犀草素-7-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-β-D-葡萄糖苷、金合歡素-7-β-D-葡萄糖苷等多種黃酮類(lèi)有效成分，早期研究發(fā)現(xiàn)菊花具有解熱、抑菌、抗流感病毒、抗心血管、抗炎等作用，近年來(lái)國(guó)內(nèi)外有研究顯示菊花具有抗氧化、抗腫瘤、抗愛(ài)滋等作用。為了進(jìn)一步規(guī)范杭白菊用藥、比較杭白菊藥材的內(nèi)在品質(zhì)和鑒別特征，本文通過(guò)高效液相、紅外

4、、紫外等方法從三個(gè)方面對(duì)不同產(chǎn)地、不同采摘時(shí)間、不同加工工藝和不同采摘時(shí)間等影響因素下的杭白菊藥材、杭白菊提取物(CME)、CME片進(jìn)行了指紋圖譜及成分分析的研究，為杭白菊與制劑的鑒別及其質(zhì)量控制提供依據(jù)。 1.杭白菊藥材、CME、CME片的高效液相指紋圖譜研究目的：建立杭白菊藥材、CME、CME片的高效液相指紋圖譜(HPLC-FP)，為杭白菊藥材、CME、CME片的鑒別及品質(zhì)控制提供依據(jù)。 方法：采用RP-HPLC法對(duì)

5、不同種植基地、不同時(shí)間采摘、不同等級(jí)及不同貯存時(shí)間的杭白菊與國(guó)內(nèi)其他品種菊花藥材及CME、CME片的主要有效成分黃酮類(lèi)進(jìn)行指紋圖譜研究。 結(jié)果：HPLC指紋圖譜中杭白菊藥材、CME、CME片的黃酮類(lèi)主要成分均得到很好分離，根據(jù)聚類(lèi)分析和相似度分析處理結(jié)果，23個(gè)不同種植基地、不同采摘時(shí)間及不同貯存時(shí)間的杭小白菊被正確地區(qū)分出來(lái)，相似度均在0.95～1.0之間，而其它菊花的相似度均小于或等于0.9，1O批CME之間整體化學(xué)成分無(wú)明

6、顯差異，4批CME片相似性很接近，且都大于0.96，同時(shí)杭白菊藥材CME、CME片之間也有較好的相似度(＞O.95)。 結(jié)論：HPLC-FP可以作為杭白菊藥材、原料藥、制劑鑒別與質(zhì)量評(píng)價(jià)的依據(jù)。2.杭白菊紅外指紋圖譜和聚類(lèi)分析的鑒別研究目的：建立杭白菊藥材紅外指紋圖譜。 方法：以杭白菊的紅外指紋圖譜為聚類(lèi)分析的對(duì)象，采用主成分分析法和系統(tǒng)聚類(lèi)分析法對(duì)杭白菊及國(guó)內(nèi)其它品種的41種菊花進(jìn)行了快速的分類(lèi)研究。 結(jié)果：由

7、于杭白菊與其他產(chǎn)地及品種菊花的紅外指紋圖譜變異度較大，其光譜聚類(lèi)的結(jié)果較理想。不同批次的杭白菊紅外指紋圖譜化學(xué)成分及含量相似，變異度較小，可作為中醫(yī)界對(duì)杭白菊藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)的依據(jù)。對(duì)于變異度較小的樣品，若要提高識(shí)別的置信度，需增加樣品的數(shù)目和采樣的代表性。 結(jié)論：紅外指紋圖譜與聚類(lèi)分析法相結(jié)合可以快速鑒別藥材的道地性。 3.杭白菊中總黃酮和主要黃酮苷的含量測(cè)定及影響因素考察目的：考察不同種植基地、不同炮制工藝、不同采摘時(shí)間

8、、不同年度杭白菊，以及不同產(chǎn)地菊花中總黃酮、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量差異。 方法：采用NaNO2-Al(NO3)3比色法測(cè)定總黃酮的含量；反相高效液相色譜2法測(cè)木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D葡萄糖苷，以ZorbaxSBC18為分離柱，乙腈-10mmol磷酸鹽緩沖液(pH=2)為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，流速1.0ml·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)338nm.。