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文檔簡介
1、核盤菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.) de Bary)是一種重要的植物病原真菌,具有廣泛的地理分布和多樣化的寄主范圍。真菌病毒可以引起植物病原真菌的弱毒特性,具有防治植物真菌病害的潛力。核盤菌中存在豐富的病毒資源,利用弱毒相關(guān)病毒防治核盤菌,是菌核病新的潛在生物防治策略之一。本研究通過篩選核盤菌異常菌株,利用高通量測序等技術(shù)對核盤菌攜帶病毒多樣性進行分析,獲得了以下研究結(jié)果。
對采集自湖南省、黑
2、龍江省和內(nèi)蒙古自治區(qū)的1800份核盤菌菌核進行純培養(yǎng),篩選獲得菌落形態(tài)異常的菌株125株。生物學(xué)測定結(jié)果顯示篩選的大部分菌株生長速度緩慢,致病力出現(xiàn)不同程度的衰退。高通量測序分析表明125株異常菌株中攜帶的病毒種類豐富,且多數(shù)為未曾報道或分類地位不確定的新病毒。病毒核酸類型有正單鏈RNA(+ssRNA)病毒、負(fù)單鏈RNA(-ssRNA)病毒、雙鏈RNA(dsRNA)病毒、單鏈DNA(ssDNA)病毒,其中ssRNA病毒占80%,dsRN
3、A病毒占18%。除裸露病毒科病毒外,共獲得78個病毒單一序列信息,隸屬于19個已知病毒科和未分類病毒科。
菌株230氣生菌絲發(fā)達,不產(chǎn)生菌核,油菜葉片上不形成病斑,是一株典型弱毒菌株。從中發(fā)現(xiàn)了一個新的多股負(fù)義鏈RNA病毒,命名為Sclerotinia sclerotiorumMirafiore lettuce virus-like(SsMiLV)。SsMiLV-RNA1基因組為7832nt,包含兩個推定的開放閱讀框(open
4、 reading frame,ORF),ORF2編碼一個分子量為269KD的假定蛋白,該假定蛋白具有RdRp保守結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)發(fā)育分析表明該病毒是蛇形病毒科的新成員,但在遺傳進化上與已報道的蛇形病毒科(Ophioviridae)病毒存在一定遺傳距離,與真菌立枯絲核菌中發(fā)現(xiàn)的真菌病毒聚成一簇。據(jù)此研究結(jié)果,建議將蛇形病毒科分成兩個不同的屬,一個寄主為植物,另一個寄主為真菌,以便更好地區(qū)分不同病毒的特點。
弱毒菌株767生長速度緩慢
5、,產(chǎn)生黃色色素,不形成菌核,致病力喪失。初步研究發(fā)現(xiàn)菌株767含有一種新型RNA病毒,命名為Sclerotinia sclerotiorum Norovirus(SsNorV),其RdRp與Bat norovirus具有24%相似性。SsNorV的基因組為11024nt,編碼兩個ORF,含有一個RdRp保守結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)發(fā)育分析顯示該病毒與星狀病毒科聚成一簇,但獨立形成一支,建議以該病毒為模式種建立一個新的病毒屬。
SsMiLV
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