MCT1、CD147在人肝癌中的表達(dá)及其反義RNA表達(dá)載體對(duì)肝癌細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：在體外試驗(yàn)中使用CD147及MCT1反義RNA表達(dá)載體影響肝癌細(xì)胞表面MCT1的表達(dá)，觀察它對(duì)腫瘤細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的干擾、對(duì)糖酵解代謝影響和抑制腫瘤細(xì)胞生長的作用。通過免疫組化方法檢測(cè)人肝癌中MCT1和CD147的表達(dá)，探討其表達(dá)與腫瘤臨床及病理學(xué)的關(guān)系。
　　 方法：體外實(shí)驗(yàn)采用HEPG2人肝癌細(xì)胞株進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。同時(shí)構(gòu)建MCT1及CD147的反義RNA表達(dá)載體，用于轉(zhuǎn)染HEPG2細(xì)胞株，HEPG2細(xì)胞分為未轉(zhuǎn)染組，轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組和

2、轉(zhuǎn)染組，用western-blot方法檢測(cè)MCT1及CD147質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后對(duì)MCT1蛋白表達(dá)的影響，并用檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)pHi及乳酸含量，繪制三組細(xì)胞的生長曲線并記錄各組生長數(shù)據(jù)，以上資料均作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。收集湘雅醫(yī)院2002年-2008年間60例肝癌手術(shù)切除標(biāo)本，對(duì)照組50例為正常肝組織。將肝癌標(biāo)本和對(duì)照正常肝組織標(biāo)本制成石蠟切片并進(jìn)行免疫組化染色，檢測(cè)不同病理級(jí)別及臨床分級(jí)肝癌組織標(biāo)本和對(duì)照標(biāo)本MCT1和CD147的表達(dá)水平。
　　

3、 結(jié)果：在細(xì)胞水平研究中，MCT1反義表達(dá)載體可抑制MCT1在細(xì)胞膜的表達(dá)，而CD147反義表達(dá)載體則可抑制MCT1在腫瘤細(xì)胞的功能，兩種載體轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞后，均可引起腫瘤細(xì)胞pHi下降，細(xì)胞內(nèi)乳酸堆積，細(xì)胞的生長受到抑制。肝癌標(biāo)本中均有MCT1和CD147高表達(dá)，且臨床病理級(jí)別高的肝癌組中二者表達(dá)水平低于于臨床病理級(jí)別低的肝癌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：運(yùn)用MCT1及CD147反義RNA表達(dá)載體轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞，可影響MC