反義CD147分子對人膽管癌細胞株侵襲性影響的實驗研究.pdf

1、目的：
　　探討反義CD147分子對人膽管癌細胞株QBC939侵襲性的影響。
　　材料和方法：
　　構建含反義 CD147分子片段的重組真核表達質粒。將人膽管癌細胞株QBC939分為三組：
　　1.反義CD147組：運用重組真核表達質粒asCD147-pcDNA3.1(-)轉染QBC939細胞；
　　2.空質粒組：運用pcDNA3.1(-)空質粒轉染QBC939細胞；
　　3.對照組：運用DMEM常規(guī)

2、處理細胞。采用MTT法檢測各組中QBC939細胞的生長情況，采用RT-PCR和Western-Blotting法分別對三組QBC939細胞中的CD147mRNA、MMP-2mRNA、MMP-9mRNA、TIMP-2mRNA的表達水平及其對應蛋白的表達水平進行檢驗。
　　結果：
　　構建了攜帶反義CD147分子片段的重組真核表達質粒，MTT法檢測顯示：三組QBC939細胞的生長曲線及對數生長期情況兩兩相比無顯著差異（P>0.0

3、5）。RT-PCR法檢測顯示：反義CD147組QBC939細胞中CD147 mRNA的表達與空質粒組及對照組兩兩相比明顯降低（P<0.05），空質粒組與對照組相比無顯著差異（P>0.05）；反義CD147組QBC939細胞中MMP-2mRNA的表達與空質粒組和對照組兩兩相比明顯降低（P<0.05），空質粒組與對照組相比無顯著差異（P>0.05）；反義CD147組QBC939細胞中MMP-9mRNA的表達與空質粒組和對照組兩兩相比無顯著差

4、異(P>0.05)；反義CD147組QBC939細胞中TIMP-2mRNA的表達與空質粒組和對照組兩兩相比無顯著差異(P>0.05)。Western-blotting檢測發(fā)現：反義CD147組QBC939細胞中CD147蛋白的表達與空質粒組和對照組兩兩相比明顯降低（P<0.05），空質粒組與對照組相比無顯著差異（P>0.05）；反義CD147組QBC939細胞中MMP-2蛋白的表達與空質粒組和對照組兩兩相比明顯降低（P<0.05），空質

5、粒組與對照組相比無顯著差異（P>0.05）；反義CD147組QBC939細胞株中MMP-9蛋白的表達與空質粒組和對照組兩兩相比無顯著差異(P>0.05)；反義CD147組QBC939細胞株中TIMP-2蛋白的表達與空質粒組和對照組兩兩相比無顯著差異(P>0.05)。
　　結論：
　　1.反義CD147對膽管癌細胞株QBC939的生長無影響。
　　2.反義CD147對膽管癌細胞株QBC939中 MMP-9mRNA及TIM