食管黏膜鱗狀上皮癌相關(guān)microRAN的研究.pdf

1、食管癌是常見(jiàn)的上消化道惡性腫瘤,在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率和死亡率分別為第8位和第6位。我國(guó)的食管癌發(fā)病率居世界首位,同時(shí)也是食管癌死亡率最高的國(guó)家。我國(guó)食管癌以食管鱗狀細(xì)胞癌(ESCC)為主,術(shù)后5年生存率為20％左右,死亡率居高不下的主要原因是大部分患者就診時(shí)已是晚期,因此早診早治是解決我國(guó)食管癌死亡率居高不下的重要手段。然而目前對(duì)于食管黏膜上皮癌變?cè)缙诘姆肿訕?biāo)志物缺乏了解。
　　 真核細(xì)胞中廣泛存在著一類長(zhǎng)度為19-24個(gè)核苷酸

2、的非編碼小RNA分子,即microRNA(miRNA)。這類RNA分子能夠抑制基因的表達(dá),在細(xì)胞的多種生命活動(dòng),如增殖、分化、凋亡中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。因而,miRNA與腫瘤發(fā)生也有著密切的關(guān)系。
　　 我們利用TaqMan human microRNA arrays檢測(cè)了3對(duì)食管原位癌和3對(duì)進(jìn)展期ESCC(T3N0M0)的病變及配對(duì)正常組織miRNA表達(dá)譜,發(fā)現(xiàn)了4個(gè)在病變與配對(duì)正常組織中有顯著差異表達(dá)的miRNAs:miR-

3、133a,miR-143,miR-145與miR-375。我們用實(shí)時(shí)定量PCR的方法檢測(cè)了這4個(gè)miRNAs在14對(duì)食管輕中度不典型增生,26對(duì)重度不典型增生、原位癌及29對(duì)進(jìn)展期ESCC中的表達(dá)水平。發(fā)現(xiàn)miR-133a,miR-143,miR-145與miR-375在食管黏膜重度不典型增生、原位癌及進(jìn)展期ESCC中,相對(duì)表達(dá)較配對(duì)正常組織顯著下調(diào),在輕中度不典型增生中未見(jiàn)這種改變。其中,miR-133a,miR-143與miR-14

4、5的相對(duì)表達(dá)水平在重度不典型增生、原位癌組與進(jìn)展期ESCC組中無(wú)顯著差異；而miR-375在進(jìn)展期ESCC組中的相對(duì)表達(dá)水平較重度不典型增生、原位癌組顯著降低。
　　 體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明miR-375高表達(dá)能夠引起ESCC細(xì)胞系的細(xì)胞周期阻滯,從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。通過(guò)生物信息學(xué)分析及細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)證實(shí),miR-375可以在轉(zhuǎn)錄后水平抑制下游靶基因PDK1的表達(dá)。而回復(fù)PDK1在ESCC細(xì)胞中的表達(dá)則能夠逆轉(zhuǎn)miR-375引起細(xì)

5、胞周期阻滯的能力。因而PDK1介導(dǎo)了miR-375抑制ESCC細(xì)胞增殖的作用。
　　 綜上所述,我們的研究表明miR-133a,miR—143,miR-145與miR-375在食管黏膜重度不典型增生、原位癌及進(jìn)展期ESCC中均下調(diào),可能與食管黏膜上皮的癌變相關(guān),且其改變是ESCC發(fā)生的早期事件,可以作為食管鱗癌早期診斷的潛在分子標(biāo)志物。miR-375通過(guò)抑制PDK1的表達(dá)而發(fā)揮抑制食管癌細(xì)胞增殖的作用,可以為ESCC的早期診斷和