FAT10介導(dǎo)miR-34a對(duì)肝癌放療敏感性作用的研究.pdf

1、目的:
　　通過(guò)RNA干擾特異性下調(diào)肝癌細(xì)胞HepG2及MHCC-97H中FAT10基因的表達(dá)，探討FAT10對(duì)miR-34a的調(diào)控及對(duì)肝癌細(xì)胞放療敏感性作用的影響。
　　方法:
　　1、將針對(duì)FAT10的siRNA轉(zhuǎn)染到肝癌細(xì)胞株HepG2和MHCC-97H中，通過(guò)熒光定量PCR和western blot檢測(cè)FAT10mRNA和蛋白的表達(dá)變化情況。
　　2、將細(xì)胞分成:control，siRNA（-），F(xiàn)AT1

2、0-siRNA，電離輻射(IR)，IR+siRNA（-），IR+FAT10-siRNA六組，通過(guò)熒光定量PCR檢測(cè)miR-34a表達(dá)，Western blot檢測(cè)Bcl-2及Bax蛋白的表達(dá)變化。
　　3、繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期和凋亡情況。
　　結(jié)果:
　　1、干擾FAT10后肝癌細(xì)胞的FAT10mRNA和蛋白的表達(dá)受到明顯抑制，
　　2、實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Western blot結(jié)果顯示FA

3、T10-siRNA組、IR+siRNA（-）組和IR組的miR-34a表達(dá)明顯升高，Bcl-2的蛋白表達(dá)明顯降低，Bax蛋白表達(dá)明顯增高，而IR+FAT10-siRNA組表達(dá)變化更加明顯
　　3、流式細(xì)胞儀檢測(cè)表明干擾FAT10使細(xì)胞阻滯在G0/G1期，IR照射使細(xì)胞阻滯在G2/M期。并且干擾FAT10和IR都可誘發(fā)細(xì)胞凋亡，而IR+FAT10-siRNA組凋亡更為明顯。
　　結(jié)論:
　　干擾FAT10后miR-34a