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文檔簡介
1、背景:
人工關(guān)節(jié)感染是關(guān)節(jié)置換手術(shù)一個不能完全避免的并發(fā)癥。盡管其發(fā)生率不高,但由于早期診斷困難,治療復(fù)雜,常導(dǎo)致重復(fù)感染、骨質(zhì)嚴重缺損、關(guān)節(jié)功能障礙甚至截肢,顯著增加治療費用,給病人和社會造成極大的負擔。目前,在假體周圍組織或關(guān)節(jié)液中培養(yǎng)出細菌是診斷人工關(guān)節(jié)感染的金標準。然而,并不是所有假體周圍感染的病例都可以得到陽性微生物培養(yǎng)結(jié)果。
第一部分超聲裂解在人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后感染診斷中的應(yīng)用
目的:致病菌在假體
2、表面所形成的生物被膜被認為是細菌培養(yǎng)假陰性和治療反復(fù)遷延不愈的主要原因。超聲裂解通過破壞假體表面的細菌生物膜,使病原菌得以釋放,從而提高細菌培養(yǎng)。本研究即利用此項技術(shù),探討其在人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后感染診斷中的效率。
方法:對臨床可疑假體周圍感染或考慮假體無菌性松動的病人(共46例)進行翻修手術(shù)。將翻修術(shù)中取出的假體進行超聲震蕩處理,并將所得的裂解液進行常規(guī)細菌培養(yǎng)。比較普通細菌培養(yǎng)及超聲裂解的敏感性及特異性。
結(jié)果:組織
3、及關(guān)節(jié)液常規(guī)細菌培養(yǎng)的診斷效率無差異。超聲裂解的敏感性(64.71%,95%CI:0.46-0.80)高于普通細菌培養(yǎng)(32.35%,95%CI:0.17-0.50,P<0.05)。結(jié)論:超聲裂解可以提高假體周圍感染病原學檢出率。
第二部分基于16S rRNA的PCR檢測技術(shù)在人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后感染診斷中的應(yīng)用
目的:基于細菌基因高度保守區(qū)域的16S rRNA基因的序列比對鑒定技術(shù),是一種建立在基因文庫及生物信息學技術(shù)
4、上的較為成熟的細菌快速鑒定方法。本研究即是利用此技術(shù),探討其在診斷假體周圍感染的效率。
方法:分析6例無菌性松動及22例假體周圍感染行人工髖關(guān)節(jié)翻修患者的資料,根據(jù)細菌16S rRNA保守基因片段設(shè)計引物,并采用普通PCR及Real time PCR方法檢測假體周圍組織、關(guān)節(jié)液中的細菌以診斷假體周圍感染。同時,將翻修術(shù)中所取得的組織、關(guān)節(jié)液標本進行常規(guī)細菌培養(yǎng);比較組織及關(guān)節(jié)液普通細菌培養(yǎng)敏感性,比較組織、關(guān)節(jié)液常規(guī)培養(yǎng)及16
5、S rRNA PCR方法檢出細菌的敏感性。結(jié)果:組織及關(guān)節(jié)液常規(guī)細菌培養(yǎng)的診斷效率無差異。Real time-PCR方法用于關(guān)節(jié)液的微生物檢出相較于傳統(tǒng)PCR方法升高,但用于組織中微生物的檢出并未明顯提高。同時,PCR方法并未較普通培養(yǎng)靈敏度高。
結(jié)論:16S rRNA PCR方法在假體周圍感染組織及關(guān)節(jié)液的檢出率尚不明確。
第三部分超聲裂解聯(lián)合16S rRNA Real-time PCR診斷人工關(guān)節(jié)感染
6、目的:超聲裂解聯(lián)合16S rRNA Real-time PCR技術(shù)在人工關(guān)節(jié)感染診斷中應(yīng)用尚不明確,因此本研究旨在探討其在在診斷假體周圍感染的效率。
方法:分析29例因假體周圍感染或假體無菌性松動而行人工髖關(guān)節(jié)翻修患者,將翻修術(shù)中取出的假體進行超聲震蕩處理,并經(jīng)所得裂解液進行常規(guī)細菌培養(yǎng)及PCR檢測。比較超聲裂解及超聲裂解聯(lián)合PCR方法的敏感性、特異性。
結(jié)果:超聲裂解液培養(yǎng)及超生裂解聯(lián)合PCR的診斷效率無明顯差異,
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