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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 研究皮質(zhì)發(fā)育畸形(MCD)仔鼠與正常仔鼠的生長(zhǎng)發(fā)育差異,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)層特異性標(biāo)志物Map1b和AIS的標(biāo)記物AnkG在MCD大鼠皮質(zhì)中的表達(dá)變化,揭示MCD大鼠皮質(zhì)AIS區(qū)的可塑性改變,為深入探討AIS對(duì)MCD大鼠模型癲癇易感的意義提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
方法: 在SD大鼠胚胎17天時(shí),向孕鼠腹腔注射卡莫司汀(BCMU),建立皮質(zhì)發(fā)育畸形仔鼠模型,對(duì)照組在相同時(shí)間注射10%葡萄糖溶液。選擇出生當(dāng)天(P0),出生后7天(P7),1
2、4天(P14),28天(P28)和56天(P56)作為觀察時(shí)間點(diǎn),分別在各時(shí)間點(diǎn)選取對(duì)照組和MCD組仔鼠進(jìn)行體重,腦濕重,身長(zhǎng)的測(cè)量。在各時(shí)間點(diǎn)每組隨機(jī)選取6只仔鼠用于制備石蠟切片和冰凍切片,采用HE染色方法觀察兩組仔鼠皮質(zhì)的形態(tài)改變,免疫組織化學(xué)染色方法觀察Map1b在兩組皮質(zhì)內(nèi)的表達(dá)差異,并驗(yàn)證MCD模型是否成功,應(yīng)用免疫熒光染色方法觀察AnkG在兩組皮質(zhì)內(nèi)的表達(dá)變化。
結(jié)果: 兩組仔鼠的體重在P0期無(wú)顯著差異(P>0.0
3、5),從P7后開(kāi)始,之后的各時(shí)間點(diǎn)體重差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);兩組仔鼠的腦濕重在P0和P7無(wú)顯著差異(P>0.05),從P14開(kāi)始,之后的各時(shí)間點(diǎn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);兩組仔鼠身長(zhǎng)在各時(shí)間點(diǎn)均無(wú)顯著差異(P>0.05)。Map1b在對(duì)照組仔鼠顳葉皮質(zhì)中主要表達(dá)在Ⅱ,Ⅲ,Ⅴ層,在各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)模式無(wú)明顯變化,Map1b在MCD組仔鼠顳葉皮質(zhì)中表達(dá)在Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ層。在MCD組仔鼠皮質(zhì)中,AnkG陽(yáng)性細(xì)胞形態(tài)與對(duì)照組存在顯
4、著差異,AIS形態(tài)正?;瘯r(shí)間晚于對(duì)照組,AnkG陽(yáng)性區(qū)域所代表的AIS長(zhǎng)度在P0時(shí)與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05),從P7開(kāi)始,之后的各時(shí)間點(diǎn)的AIS長(zhǎng)度均短于對(duì)照組(P<0.05)。
結(jié)論: Map1b在MCD組仔鼠皮質(zhì)中的表達(dá)位置由正常的ⅡⅢⅤ層轉(zhuǎn)移到ⅡⅢⅣ層對(duì)應(yīng)的位置,提示在MCD大鼠皮質(zhì)中,Map1b所標(biāo)記的陽(yáng)性細(xì)胞發(fā)生遷移異常;MCD組仔鼠腦皮質(zhì)AIS的長(zhǎng)度在出生一周后有所縮短,形態(tài)表現(xiàn)為螺旋狀或鋸齒狀彎曲,形態(tài)
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