早期雷帕霉素干預對X射線宮內照射所致皮質發(fā)育畸形大鼠腦發(fā)育的影響.pdf

1、目的：探索X射線宮內照射孕17天大鼠所致子一代(F1)大鼠皮質發(fā)育畸形(MCD)的分子機制，并進一步觀察早期雷帕霉素干預對該模型中F1MCD大鼠腦發(fā)育的影響及機制。
　　方法：采用X射線宮內照射孕17天大鼠，使孕鼠所產F1大鼠成為MCD模型。隨機選取健康SD孕期大鼠孕正常組2只，孕雷帕霉素干預組、孕模型組及孕溶劑組各3只，除孕正常組不做任何處理外，其余各組孕鼠分別于孕17天行195cGy X射線宮內照射，孕雷帕霉素干預組于孕18天

2、進行腹腔注射雷帕霉素，溶劑組于孕18天予以腹腔注射溶劑處理，連續(xù)每天注射致產后斷奶（產后21天，共25天），所生F1代大鼠對應選作正常組、雷帕霉素干預組、模型組及溶劑組，飼養(yǎng)致大鼠成年期（產后77天），然后采用Morris水迷宮檢測大鼠學習記憶能力，腦電圖監(jiān)測大鼠大腦癇樣波發(fā)放情況，大體標本及病理HE染色觀察大鼠腦組織結構及神經元變化，蛋白免疫印跡法檢測mTOR信號通路下游蛋白S6的表達情況，RT-PCR檢測S6mRNA表達情況，最后統(tǒng)

3、計分析并比較各組大鼠各指標的異同。
　　結果：(1)隨著訓練時間的增加，各組大鼠逃生潛伏期均逐漸縮短(p＜0.05);與正常組相比，模型組和溶劑組逃生潛伏期明顯延長，目標象限時間比率明顯縮短，穿越平臺次數明顯減少（均p＜0.01），早期雷帕霉素干預后逃生潛伏期明顯好轉(p＜0.05)，穿越平臺次數、目標象限時間比率也有好轉的趨勢，模型組和溶劑組各指標均無明顯差異（均p＞0.05）。(2)與正常組比較，模型組和溶劑組腦電圖癇樣波發(fā)放

4、頻率明顯增加，波幅增高，而雷帕霉素干預組可明顯改善癇樣波發(fā)放的頻率和程度(均p＜0.05)，模型組和溶劑組無明顯差異(p＞0.05)。(3)大體標本和病理HE染色與正常組比較，模型組和溶劑組大鼠具有腦組織各徑線明顯減小、四疊體暴露、胼胝體缺失、側腦室擴大、皮層結構紊亂、海馬結構中斷及異常結節(jié)形成、肥大神經元等特點。早期使用雷帕霉素干預后MCD大鼠腦皮層結構紊亂及肥大神經元有所改善，海馬結構連續(xù)性恢復，海馬結節(jié)消失。(4)與正常組相比，模

5、型組及溶劑組大鼠腦組織mTOR信號通路異常激活，S6蛋白表達增加（均p＜0.05），早期使用雷帕霉素干預后可抑制這種異常激活，使蛋白的表達下降（均p＜0.05），模型組和溶劑組均無明顯差異（均p＞0.05）。(5)與正常組比較，模型組及溶劑組大鼠的基因水平也發(fā)生相應改變，S6mRNA表達相應增加，早期雷帕霉素干預后，S6mRNA的表達有所下降，而模型組與溶劑組均無明顯差異（均p＞0.05）。
　　結論：(1)X射線宮內照射孕17天