抗苗勒氏管激素與多囊卵巢綜合征患者體外受精-胚胎移植臨床結(jié)局關(guān)系的研究.pdf

1、體外受精-胚胎移植技術(shù)目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于不孕不育的治療。IVF治療過(guò)程中預(yù)測(cè)IVF結(jié)局以及與IVF妊娠率相關(guān)的因素一直是研究的熱點(diǎn)。如何提高和獲得高質(zhì)量的卵子和胚胎更是重中之重，它是決定IVF-ET成功的關(guān)鍵之一，也是目前研究的難點(diǎn)之一。卵子的質(zhì)量與卵泡發(fā)生、發(fā)育、生長(zhǎng)、成熟過(guò)程中的諸多因素相關(guān)。近年來(lái)卵巢局部微調(diào)節(jié)在卵泡生長(zhǎng)發(fā)育中的作用越來(lái)越受到關(guān)注，它們共同調(diào)節(jié)卵泡由始基、初級(jí)、次級(jí)卵泡至成熟卵泡這個(gè)有序連續(xù)過(guò)程。由顆粒細(xì)胞分泌的抗

2、苗勒激素屬于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子超家族的成員，又名苗氏管抑制物質(zhì)。1947年，Jost實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在雄性胎兒的發(fā)育過(guò)程中有一種不同于睪酮的因子可引起苗勒氏管的退化，即抗苗勒激素。AMH是由兩個(gè)相同的70kb亞基組成的二聚糖蛋白。在男性胎兒的發(fā)育過(guò)程中，AMH的分泌是苗勒氏管衰退的本質(zhì)，因此形成正常發(fā)育的男性生殖管道。在女性，苗勒氏管是形成子宮、輸卵管和陰道上部的原始細(xì)胞。妊娠36周的女性胎兒至絕經(jīng)期婦女的血清中均可檢測(cè)到AMH。AMH在始基卵泡中

3、無(wú)表達(dá)，在竇前卵泡和小竇卵泡的顆粒細(xì)胞中高表達(dá)，在閉鎖卵泡中無(wú)表達(dá)。AMH調(diào)控卵泡生長(zhǎng)和發(fā)育，具有抑制始基卵泡啟動(dòng)募集，降低竇前卵泡和小竇卵泡對(duì)FSH的反應(yīng)影響周期募集的作用。 近年來(lái)，AMH與多囊卵巢綜合征的關(guān)系引起了學(xué)者的關(guān)注。PCOS是育齡婦女最常見(jiàn)的內(nèi)分泌紊亂性疾病。特點(diǎn)為不孕、月經(jīng)失調(diào)、多毛、肥胖及雙側(cè)卵巢增大成多囊樣改變。PCOS影響著世界范圍內(nèi)5％～10％的育齡期婦女，1935年由Stein和Leventhal兩位

4、學(xué)者發(fā)現(xiàn)的，病理生理學(xué)機(jī)制尚不明確。其閉經(jīng)和不孕對(duì)女性身心的損害以及持續(xù)雌激素刺激而造成的高發(fā)子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌和心腦血管疾病的危險(xiǎn)越來(lái)越引起人們的重視。無(wú)排卵或者排卵稀發(fā)是PCOS導(dǎo)致女性不孕的主要因素，對(duì)于反復(fù)促排卵不孕的PCOS患者往往需要輔助生殖技術(shù)的治療。由于其臨床表現(xiàn)高度多樣化，在超促排卵過(guò)程卵巢反應(yīng)的難控性，以及卵子質(zhì)量問(wèn)題，是當(dāng)今輔助生育技術(shù)領(lǐng)域的難點(diǎn)和熱點(diǎn)。既往研究探索了血清AMH的表達(dá)與PCOS患者卵泡發(fā)育異常的關(guān)系

5、，研究發(fā)現(xiàn)月經(jīng)第三天基礎(chǔ)血清AMH濃度與2～5mm小竇卵泡數(shù)目相關(guān)，PCOS患者小竇卵泡數(shù)較正常人增加2～3倍，則血清AMH也增加2～3倍，AMH可能和PCOS的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。但PCOS患者行IVF-ET治療超促排卵時(shí)，卵泡液及血清中的AMH對(duì)IVF治療中臨床特征的影響國(guó)內(nèi)目前尚未見(jiàn)研究報(bào)道。 隨著輔助生殖技術(shù)的不斷發(fā)展，IVF-ET成為治療不孕癥的重要手段。成功的IVF-ET臨床妊娠是優(yōu)質(zhì)胚胎、正常的子宮內(nèi)膜容受性和良好的內(nèi)分

6、泌水平共同作用的結(jié)果。影響IVF-ET結(jié)局涉及年齡、不孕類(lèi)別、不孕原因、基礎(chǔ)卵泡刺激素、促性腺激素釋放激素用量、子宮內(nèi)膜厚度和血清雌二醇水平、獲卵數(shù)等多方面的因素。近年來(lái)在女性生殖領(lǐng)域中，AMH受到了相當(dāng)?shù)闹匾?，?duì)其研究也同見(jiàn)深入。研究發(fā)現(xiàn)基礎(chǔ)血清AMH可以早期準(zhǔn)確預(yù)測(cè)卵巢儲(chǔ)備力的變化。AMH由竇前卵泡和小竇卵泡的顆粒細(xì)胞分泌，抑制卵泡的生長(zhǎng)，防止卵泡過(guò)快過(guò)早的消耗，保存卵巢的儲(chǔ)備，因此，臨床上已將其作為卵巢儲(chǔ)備的標(biāo)志，也可用于監(jiān)測(cè)由于

7、卵巢衰老導(dǎo)致的卵泡耗竭。AMH與卵巢狀態(tài)和卵泡發(fā)育的關(guān)系密切，它與IVF-ET治療臨床特征的關(guān)系目前仍然沒(méi)有一致的結(jié)論，AMH預(yù)測(cè)IVF治療結(jié)局存在很多爭(zhēng)議。超促排卵后血清及卵泡液AMH水平與IVF臨床治療結(jié)局關(guān)系國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道。 AMH在女性生殖中扮演如此重要的角色，在臨床的角度對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步的研究，能為PCOS患者的診斷及治療提供現(xiàn)實(shí)依據(jù)，為IVF治療提供臨床指導(dǎo)。 第一部分AMH與PCOS患者IVF-ET治療臨床特

8、征的關(guān)系[ 研究目的：通過(guò)與對(duì)照組患者對(duì)比分析PCOS患者進(jìn)行IVF-ET超促排卵治療后，取卵日血清及卵泡液中的AMH水平與臨床特征的關(guān)系，初步探討AMH與PCOS發(fā)生的關(guān)系及與IVF-ET超促排卵治療臨床特征的關(guān)系。 材料和方法： 1.選取2007年10月至2008年1月在南方醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心行IVF/ICSI-ET?；颊撸挲g均≤35歲共64例。分為兩組，第一組為PCOS患者，第二組為對(duì)照組患者。PCOS的診

9、斷標(biāo)準(zhǔn)按照2003年鹿特丹診斷標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)照組為同期行IVF-ET治療患者，無(wú)內(nèi)分泌異常。所有患者的超促排卵方案均采用黃體期長(zhǎng)方案。 2.取卵日上午9:00，靜脈全身麻醉前抽取患者靜脈血液2ml置于干燥的玻璃離心管內(nèi)，分離血清，保存待測(cè)。超聲引導(dǎo)下行取卵術(shù)時(shí)，吸取大小為15-18mm卵泡，留取第一管清亮混合卵泡液，置離心管內(nèi)，去除顆粒細(xì)胞，保存待測(cè)。 3.記錄每例患者的獲卵數(shù)，正常受精卵子數(shù)，移植胚胎數(shù)，總胚胎數(shù)。移植后5周

10、B超檢查子宮內(nèi)見(jiàn)妊娠囊及原始心管搏動(dòng)，確定為臨床妊娠。 4.抗苗勒氏管激素ELISA試劑盒測(cè)定血清及卵泡液中的AMH水平，操作嚴(yán)格按試劑盒的要求。 5.所有數(shù)據(jù)均使用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果： 1.PCOS與對(duì)照組患者IVF-ET治療臨床特征差異。 PCOS組與對(duì)照組比較患者年齡、不孕時(shí)間、體重指數(shù)、基礎(chǔ)血清E2、FSH、LH水平、基礎(chǔ)血清LH/FSH值、使用Gn的天數(shù)、HCG日

11、E2、LH、P水平、HCG日≥14mm卵泡數(shù)、取卵日子宮內(nèi)膜厚度、獲卵數(shù)、移植胚胎個(gè)數(shù)等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PCOS組基礎(chǔ)竇狀卵泡數(shù)增多，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；PCOS組Gn的用量較對(duì)照組少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。PCOS組取卵日抽吸卵泡個(gè)數(shù)多于對(duì)照組、獲卵率低于對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。PCOS組與對(duì)照組患者受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、著床率、妊娠率、流產(chǎn)率、繼續(xù)妊娠率等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

12、。PCOS組(21.43％)流產(chǎn)率較對(duì)照組(6.25％)呈增高趨勢(shì)，而繼續(xù)妊娠率(78.57％，93.75％)呈降低趨勢(shì)。 2.兩組患者血清、卵泡液中的AMH水平差異。 卵泡液與血清中的AMH水平PCOS組高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。卵泡液AMH/血清AMH比值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論： 1.通過(guò)研究PCOS患者行IVF-ET超促排卵治療后，取卵日血清及卵泡液中的AMH水

13、平與PCOS臨床特征及結(jié)局的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)PCOS患者AMH的增高和基礎(chǔ)竇狀卵泡的數(shù)目的增多有關(guān)，AMH能反映PCOS這一臨床特征。PCOS患者血清及卵泡液中AMH水平高于對(duì)照組，Gn的用藥量低于對(duì)照組，提示AMH能反映卵巢對(duì)Gn的反應(yīng)性，對(duì)臨床治療方案的選擇和調(diào)整用藥劑量有臨床意義。 2.PCOS患者卵泡液及血清AMH水平增高于對(duì)照組，獲卵率低于對(duì)照組，提示AMH與PCOS患者卵泡發(fā)育異常有關(guān)。PCOS患者與對(duì)照組比較流產(chǎn)率呈增高

14、趨勢(shì)，推測(cè)AMH可能與IVF自然流產(chǎn)的發(fā)生有關(guān)，為研究IVF自然流產(chǎn)的發(fā)生機(jī)制提供新的研究方向。 第二部分AMH與IVF-ET治療臨床結(jié)局的關(guān)系 研究目的：通過(guò)分析PCOS及對(duì)照組患者IVF-ET超促排卵治療后取卵日的血清與卵泡液中的AMH水平，研究AMH與IVF-ET治療臨床結(jié)局的關(guān)系，同時(shí)分析血清及卵泡液中的AMH水平與IVF妊娠相關(guān)的因素之間的相關(guān)性。 材料和方法：同第一部分。 結(jié)果： 1.

15、PCOS組妊娠與未妊娠患者血清與卵泡液AMH的差異。 PCOS組妊娠與未妊娠患者的年齡、不孕時(shí)間、基礎(chǔ)血清E2、FSH、LH水平、基礎(chǔ)血清LH/FSH值、基礎(chǔ)竇狀卵泡數(shù)、使用Gn的天數(shù)、Gn的用藥量、HCG同E2、LH、P水平、HCG日≥14mm卵泡數(shù)、取卵日子宮內(nèi)膜厚度、取卵日抽吸卵泡個(gè)數(shù)、獲卵數(shù)等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)?；颊攉@卵率、受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。妊娠患者血清與卵泡液中的

16、AMH水平顯著增高，與未妊娠患者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2.對(duì)照組妊娠與未妊娠患者血清及卵泡液AMH的差異。 對(duì)照組妊娠與未妊娠患者的年齡、不孕時(shí)間、基礎(chǔ)血清E2、FSH、LH水平、基礎(chǔ)血清LH/FSH值、基礎(chǔ)竇狀卵泡數(shù)、Gn的用量、使用Gn的天數(shù)、HCG日E2、LH、P水平、HCG日≥14mm卵泡數(shù)、取卵日子宮內(nèi)膜厚度、取卵日抽吸卵泡個(gè)數(shù)、獲卵數(shù)等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)?；颊攉@卵率、受精率、卵

17、裂率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。妊娠患者中優(yōu)質(zhì)胚胎率增多，與未妊娠患者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。血清與卵泡液中的AMH水平在妊娠患者中顯著增高與未妊娠患者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3.血清及卵泡液AMH水平與妊娠的關(guān)系 PCOS組中所有妊娠患者卵泡液AMH水平均>6.0ng/ml，未妊娠患者卵泡液AMH水平<6.0ng/ml占未妊娠患者總數(shù)81.12％。對(duì)照組中所有妊娠患者卵泡液AMH水平

18、>2.0ng/ml，未妊娠患者卵泡液AMH水平<2.0ng/ml，占未妊娠患者總數(shù)55.56％。 結(jié)論： 1.本研究通過(guò)分析IVF治療后取卵日AMH水平與IVF治療時(shí)臨床特征的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)PCOS組與對(duì)照組中妊娠患者的血清及卵泡液AMH水平均顯著高于未妊娠患者，提示取卵日血清及卵泡液AMH與IVF妊娠有關(guān)，對(duì)IVF治療臨床結(jié)局有預(yù)測(cè)價(jià)值。 2.低水平的AMH不利于胚胎著床。這為研究IVF治療胚胎著床提供了新的臨床依