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1、目的:利用介孔納米二氧化硅的尺寸優(yōu)勢(shì)填充入牙本質(zhì)小管以治療牙本質(zhì)過(guò)敏癥;進(jìn)一步的在介孔孔道內(nèi)負(fù)載鈣離子和磷酸根離子,并通過(guò)表面開(kāi)關(guān)設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)自發(fā)性的緩慢釋放從而形成鈣磷酸鹽沉淀加固納米粒子的封堵效果。
材料與方法:藥物制備:采用稀溶液法以十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)為模板劑,正硅酸乙酯(TEOS)為硅源,在58℃條件下水熱合成制備介孔納米二氧化硅粒子(MSNs)[1]。對(duì)合成的介孔納米二氧化硅(MSNs)通過(guò)掃描電鏡(SEM
2、),透射電鏡(TEM)觀察表面及內(nèi)部結(jié)構(gòu),通過(guò)小角X射線衍射來(lái)(XRD)表征MSNs內(nèi)部孔道在微觀結(jié)構(gòu)上的有序性。對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的反復(fù)探索,確定將表面無(wú)孔氧化硅殼層(sSiO2 shell)作為開(kāi)關(guān)的最佳條件。將0.25gMSNs分散在15mL乙醇與水的混合液中(V乙醇∶V水=2∶1),在攪拌下加入一定氨水,溫度穩(wěn)定于58℃后,加入一定量的TEOS(0.25mL,1mL),反應(yīng)2小時(shí)后,離心,干燥,研磨,對(duì)殼層結(jié)構(gòu)采用透射電子顯微鏡(TEM
3、)進(jìn)行觀察。將布洛芬為模型藥物載入到上述介孔二氧化硅載藥系統(tǒng),在37℃下模擬體液(SBF)中進(jìn)行模擬釋放,利用紫外分光光度計(jì)測(cè)量釋放出來(lái)的藥物濃度(特定波長(zhǎng)λ=264 nm)。通過(guò)調(diào)控殼層不同厚度以控制釋放速率,確定最佳殼層厚度。將上述無(wú)孔氧化硅-介孔氧化硅(sSiO2-MSNs system)可控釋放藥物載體系統(tǒng)應(yīng)用于鈣離子(Ca2+)和磷酸根(PO43-)的負(fù)載以及釋放,取3.0gCaCl2或者NaH2PO4溶解于5mL去離子水中,
4、待完全溶解后依次加入0.25gMSN,10mL無(wú)水乙醇,常溫下攪拌12h后加入2mL氨水,穩(wěn)定溫度至58℃之后加入1mLTEOS,繼續(xù)反應(yīng)2h,離心,去離子水,乙醇依次洗滌之后干燥研磨待用,對(duì)孔道的封閉效果用比表面積和孔隙分析儀進(jìn)行氮?dú)馕矫摳?BET)測(cè)試,并對(duì)鈣離子的釋放速率進(jìn)行測(cè)定。測(cè)試:取sSiO2-Ca@MSNs和sSiO2-P@MSNs各0.015g,與150μL去離子水混合,制成粉漿,用口腔常用涂布粘接劑使用的小毛刷將該粉
5、漿反復(fù)涂抹在牙本質(zhì)片的表面,間隔30s再涂一次,如次重復(fù)3次,用掃描電鏡觀察表面及縱斷面的封堵效果。生物學(xué)測(cè)評(píng):采用CCK-8法,分別對(duì)MSNs材料染液,sSiO2-Ca@MSNs和sSiO2-P@MSNs浸提液,sSiO2-Ca@MSNs材料染液,sSiO2-P@MSNs材料染液進(jìn)行細(xì)胞毒性的檢測(cè)。
結(jié)果:通過(guò)掃描電鏡可以觀察到合成的介孔納米二氧化硅尺寸較為均一,在80-110nm之間,透射電鏡可見(jiàn)其內(nèi)部孔道結(jié)構(gòu)清晰,XRD
6、顯示在2°-4°范圍內(nèi)形成了明顯的波峰,并且具有良好的分散性。將MSNs外包覆殼層作為釋放的開(kāi)關(guān),通過(guò)調(diào)控殼層的厚度可以控制釋放速率,將鈣離子載入緩釋系統(tǒng)后其緩釋時(shí)間達(dá)7小時(shí),達(dá)到了預(yù)期的緩釋效果。將載入鈣和磷酸根離子的介孔納米二氧化硅緩釋系統(tǒng)混合后涂敷牙本質(zhì)片,掃描電鏡觀察其表面封閉及縱斷面都達(dá)到了一定封堵效果。通過(guò)細(xì)胞毒性檢測(cè)結(jié)果顯示其生物相容性較好。
結(jié)論:介孔納米二氧化硅載藥緩釋系統(tǒng)能夠封閉牙本質(zhì)小管,并且具有良好的細(xì)
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