糖皮質(zhì)激素快速抑制人中性粒細胞脫顆粒的非基因組機制.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、　　本實驗采用Percoll不連續(xù)梯度密度離心法純化人外周血PMN；以甲酰三肽(N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine，fMLP)和佛波酯(phorbolmyristateacetate，PMA)為刺激物激發(fā)PMN脫顆粒；應(yīng)用酶反應(yīng)比色法和ELISA法檢測PMN顆粒標志物髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)、乳鐵蛋白(lactoferrin，LF)和溶菌酶(lysozyme，LZ

2、)釋放量；在倒置相差顯微鏡下觀察GCs快速抑制PMN脫顆粒的形態(tài)學(xué)變化；采用放免方法檢測PMN脫顆粒胞內(nèi)cAMP水平；利用Fura-2/AM顯微熒光檢測技術(shù)檢測胞內(nèi)游離鈣離子濃度([Ca2+]i)。　　本實驗表明，大劑量GCs可以通過非基因組機制快速抑制人外周血中性粒細胞的脫顆粒，且胞內(nèi)cAMP水平的升高、[Ca2+]i的降低是其可能的機制。我們首次提出GCs對PMN脫顆粒的快速非基因組抑制作用，為GCs的抗炎作用及其機制提供了新的思

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