長非編碼RNA-ANCR對三種牙源性干細(xì)胞增殖及分化的調(diào)控作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、牙源性干細(xì)胞是一類來源于牙齒組織的具有多向分化潛能和自我增殖能力的成體干細(xì)胞。牙髓干細(xì)胞(dental pulp stem cells,DPSC)、牙周膜干細(xì)胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)以及根尖牙乳頭干細(xì)胞(stem cells from the apical papilla,SCAP)都是非常重要的牙源性干細(xì)胞,是組織工程研究領(lǐng)域充滿潛力的種子細(xì)胞。許多因素都對牙源性干細(xì)胞的增殖分化

2、有重要的調(diào)節(jié)作用。隨著對 microRNA調(diào)控作用的深入研究,學(xué)者們發(fā)現(xiàn)很多非編碼RNA都在牙源性干細(xì)胞的增殖分化調(diào)控中起著重要的作用。
  在人類基因組中,有93%的DNA都會轉(zhuǎn)錄為RNA,但僅有2%的RNA具有編碼蛋白質(zhì)的功能,眾多的 DNA最終轉(zhuǎn)錄為非編碼 RNA。長鏈非編碼 RNA(long noncoding RNA,lncRNA)過去被認(rèn)為是轉(zhuǎn)錄過程中的雜音,沒有實際作用。但近些年來,隨著研究的深入,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)其在表

3、觀遺傳、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)中起著重要的調(diào)控作用。ANCR(anti-differetiation noncoding RNA,抗分化非編碼RNA)就是具有分化調(diào)控作用的lncRNA。但還沒有關(guān)于ANCR在牙源性干細(xì)胞分化領(lǐng)域的相關(guān)調(diào)控研究。本實驗通過RNAi下調(diào)ANCR在牙源性干細(xì)胞中的表達(dá),來觀察其對牙源性干細(xì)胞增殖分化的調(diào)控作用。
  課題所取得的主要結(jié)果如下:
  1. ANCR對DPSC的成骨、成脂、成神經(jīng)分化有重

4、要的調(diào)控作用
  我們通過病毒轉(zhuǎn)染下調(diào)ANCR在DPSC中的表達(dá),發(fā)現(xiàn)下調(diào)ANCR對DPSC的增殖能力無明顯影響,但可以促進(jìn) DPSC的成骨、成脂、成神經(jīng)分化,上調(diào)相關(guān)基因的表達(dá)。下調(diào)ANCR可以明顯提高DPSC的軸突形成能力。
  2. ANCR對PDLSC的增殖、成骨、成脂、成神經(jīng)分化有重要的調(diào)控作用
  我們通過病毒轉(zhuǎn)染下調(diào)ANCR在DPSC中的表達(dá)。對比ANCR下調(diào)后的PDLSC及正常 PDLSC后,發(fā)現(xiàn)下調(diào)

5、ANCR可以促進(jìn) PDLSC的增殖能力,并且可以促進(jìn)PDLSC的成骨,成脂,成神經(jīng)分化,上調(diào)相關(guān)基因的表達(dá)。下調(diào)ANCR促進(jìn)PDLSC的成骨分化與Wnt通路相關(guān),是通過下調(diào)GSK3-β降解復(fù)合物來實現(xiàn)對PDLSC的成骨分化調(diào)控。與DPSC不同的是下調(diào)ANCR后,PDLSC經(jīng)過神經(jīng)誘導(dǎo)后形態(tài)更加類似于神經(jīng)元體部。
  3. ANCR對SCAP的成骨、成脂分化有重要的調(diào)控作用
  我們通過病毒轉(zhuǎn)染下調(diào)ANCR在DPSC中的表達(dá)。

6、對比ANCR下調(diào)后的SCAP及正常SCAP后,發(fā)現(xiàn)下調(diào)ANCR對SCAP的增殖能力無明顯影響,但可以促進(jìn)DPSC的成骨,成脂分化,上調(diào)相關(guān)基因的表達(dá)。下調(diào)ANCR對SCAP的成神經(jīng)分化無明顯影響。
  綜上所述,ANCR在三種牙源性干細(xì)胞(DPSC,PDLSC,SCAP)的增殖和分化過程中起著重要的調(diào)控作用,但對三種細(xì)胞的調(diào)控作用不盡相同。下調(diào)ANCR的表達(dá)會促進(jìn)DPSC的成骨、成脂、成神經(jīng)分化,PDLSC的增殖及成骨、成脂、成神

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