小鼠成骨細胞分化中表達上調(diào)長鏈非編碼RNA的鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：
　　篩選MC3T3-E1細胞成骨分化過程中表達上調(diào)的lncRNA，為進一步研究lncRNA對成骨分化的調(diào)控打下基礎(chǔ)。
　　方法：
　　首先培養(yǎng)MC3T3-E1細胞并誘導(dǎo)其分化，隨之提取MC3T3-E1成骨分化過程中的總RNA并予以純化，合成cDNA并行PCR擴增，繼之合成熒光標(biāo)記cRNA并行PCR擴增，純化熒光標(biāo)記cRNA并測量其濃度，將cRNA片段化并和芯片雜交，獲得microarray數(shù)據(jù)后將數(shù)據(jù)進行標(biāo)準(zhǔn)化

2、，篩選成骨分化過程中表達上調(diào)的lncRNA。繼之qRT-PCR驗證MC3T3-E1成骨分化過程中表達上調(diào)的lncRNA。然后siRNA干擾lncRNA104表達并qRT-PCR測定其抑制效率。最后測定lncRNA104表達降低時OC濃度和ALP活性。
　　結(jié)果：
　　1.篩選出19個MC3T3-E1細胞成骨分化過程中表達上調(diào)lncRNAs。
　　2.qRT-PCR證實MC3T3-E1細胞成骨分化過程lncRNA642、

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