氯丙咪嗪對大鼠睡眠-覺醒周期和增食素系統(tǒng)mRNA表達的影響.pdf

1、引言：盡管失眠是抑郁癥(depression)患者的最主要癥狀之一，但是睡眠剝奪(sleepdeprivation)，特別是快速眼球運動睡眠(rapideyemovementsleep，REMsleep)的剝奪對抑郁癥的治療作用卻是不爭的事實。其中的機制仍然不甚明了。最新資料提示，運動覺醒(activewake)調(diào)節(jié)缺陷以及由此可能產(chǎn)生的代償性安靜覺醒(quietwake)增加在抑郁癥的發(fā)病中可能起著重要作用。增食素能(orexiner

2、gic)神經(jīng)元是最近幾年新發(fā)現(xiàn)的促進覺醒的神經(jīng)元。該神經(jīng)元通過合成、釋放增食素A增加安靜覺醒，通過釋放增食素B增加運動覺醒。馮平福在2003年發(fā)現(xiàn)幼年使用氯丙咪嗪(clomipramine)處理的抑郁癥大鼠模型的多個腦區(qū)增食素B明顯降低。這些事實提示，抗抑郁治療很有可能影響增食素的分泌并產(chǎn)生對覺醒與睡眠的調(diào)節(jié)。目前對這一問題未見更多的報道。氯丙咪嗪是一種經(jīng)典的三環(huán)類抗抑郁藥，并有很強的抑制快速眼球運動睡眠(REMsleep)的作用。根據(jù)

3、睡眠/覺醒的基本構(gòu)成原理，氯丙咪嗪在抑制快速眼球運動睡眠的同時，應(yīng)該具有延長覺醒或者慢波睡眠(slowwavesleep，SWS)的作用。據(jù)此，我們認為，氯丙咪嗪可能通過影響增食素B的分泌而影響運動覺醒。 目的：通過睡眠描記的方法，觀察成年大鼠在注射氯丙咪嗪后，其睡眠/覺醒周期是否發(fā)生了變化；并且通過半定量RT-PCR檢測實驗組和對照組在額葉皮層，海馬和下丘腦增食素前體(prepro-orexin)，增食素1，2受體(OX1R，

4、OX2R)mRNA水平是否不同。 方法：選用成年雄性SD大鼠16只，體重210～250g，分為生理鹽水對照組和氯丙咪嗪注射組，每組8只。為進行長期睡眠描記，給大鼠進行腦電電極和肌電電極植入術(shù)，術(shù)后恢復(fù)5天。然后進行48小時睡眠描記，腦電圖(electroencephalogram，EEG)和肌電圖(electromyogram，EMG)經(jīng)過數(shù)/模轉(zhuǎn)換后輸入計算機，在描記第24、36和48小時分別給與皮下注射生理鹽水或氯丙咪嗪。結(jié)

5、束描記后兩小時，斷頭處死全部大鼠，取額葉皮層、海馬和下丘腦組織保存于液氮中，然后實行半定量RT-PCR。 所有數(shù)據(jù)以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。睡眠/覺醒狀態(tài)數(shù)據(jù)的比較用單因素方差分析(onewayANOVA)，mRNA半定量分析數(shù)據(jù)用t檢驗處理。以P≤0.05為差異有顯著性標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果：1.氯丙咪嗪顯著地減少了大鼠的運動覺醒時間和其在總覺醒中的比例(P＜0.01)；增加了大鼠安靜覺醒的時間和其在覺醒中的比例(

6、P＜0.01)。2.氯丙咪嗪對大鼠覺醒和總睡眠的時間沒有影響(P＞0.05)。3.氯丙咪嗪顯著減少了快速眼球運動睡眠的時間和其在總睡眠中的比例(P＜0.01)，也顯著延長了大鼠的快速眼球運動睡眠潛伏期(P＜0.01)，但是沒有改變大鼠慢波睡眠的時間和其在總睡眠中的比例(P＞0.05)。4.氯丙咪嗪顯著地抑制了額葉皮層、海馬和下丘腦增食素前體mRNA的表達(P＜0.01)，同時顯著抑制了額葉皮層、海馬和下丘腦增食素2受體mRNA的表達(P