HMG-CoA還原酶對丙咪嗪抗抑郁作用的影響及機(jī)制.pdf

1、第一部分、HMG-CoA還原酶對丙咪嗪改善小鼠抑郁樣行為的影響
　　目的：一些臨床常用的抗抑郁藥在治療抑郁癥的同時(shí)會(huì)觀察到增加體重、總膽固醇升高等副作用，如丙咪嗪、米氮平等。3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶 A還原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase，HMGCR，HMG-CoA還原酶）是體內(nèi)膽固醇合成途徑中的限速酶。本研究擬觀察具有代謝副作用的抗抑郁藥對 HMGCR表達(dá)的影響，并探討

2、HMGCR在抗抑郁藥改善慢性不可預(yù)知應(yīng)激（chronic unpredictable stress，CUS）誘導(dǎo)的小鼠抑郁樣行為中的作用。
　　方法：PC12細(xì)胞培養(yǎng)、western blotting、小鼠慢性不可預(yù)知應(yīng)激（chronic unpredictable stress，CUS）模型、糖水偏好實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)、新環(huán)境攝食抑制實(shí)驗(yàn)、慢病毒介導(dǎo)的基因沉默技術(shù)。
　　結(jié)果：用丙咪嗪孵育高分化PC12細(xì)胞，可明顯增加HMGC

3、R蛋白表達(dá)，呈劑量依賴性。米氮平孵育高分化PC12細(xì)胞明顯增加HMGCR蛋白表達(dá)。長期給予丙咪嗪明顯增加正常小鼠海馬腦區(qū)HMGCR蛋白表達(dá)。在CUS暴露一周后給予丙咪嗪干預(yù)，海馬腦區(qū)注射siRNA HMGCR，繼續(xù)進(jìn)行CUS暴露和藥物處理后行為學(xué)檢測結(jié)果顯示，在對照病毒處理組中，丙咪嗪顯著改善小鼠的抑郁樣行為，而在siRNA HMGCR處理組，丙咪嗪的抗抑郁效應(yīng)被基本取消，具體表現(xiàn)在糖水偏好降低，懸尾不動(dòng)時(shí)間延長。
　　結(jié)論：抗抑

4、郁藥丙咪嗪和米氮平等可明顯增加PC12細(xì)胞株內(nèi)HMGCR蛋白的表達(dá)。下調(diào)海馬腦區(qū)HMGCR的基因表達(dá)可取消丙咪嗪的抗抑郁效應(yīng)。
　　第二部分、HMG-CoA還原酶介導(dǎo)丙咪嗪改善小鼠抑郁樣行為的機(jī)制
　　目的：在第一部分的研究結(jié)論基礎(chǔ)上，本部分進(jìn)一步研究HMGCR介導(dǎo)丙咪嗪抗抑郁效應(yīng)的藥理學(xué)機(jī)制。
　　方法：Western blotting、CUS模型、糖水偏好實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)、新環(huán)境進(jìn)食抑制實(shí)驗(yàn)、生化檢測。
　　結(jié)

5、果：Western blotting發(fā)現(xiàn)，CUS模型小鼠的海馬腦區(qū)的HMGCR表達(dá)相較正常鼠明顯下降，但在伏隔核（nucleus accumbens，NAc）腦區(qū)和前額皮層（prefrontal cortex，PFC）腦區(qū)中，CUS暴露鼠相較于正常鼠，HMGCR表達(dá)未見明顯改變，且在海馬腦區(qū)的膽固醇水平?jīng)]有明顯改變。海馬腦區(qū)立體定位給予HMGCR-甲羥戊酸（mevalonic acid，MVA）代謝通路中間產(chǎn)物香葉基香葉醇（gerany

6、lgeraniol，GGOH）后，發(fā)現(xiàn)給藥組的糖水偏好率相較于模型給溶劑組明顯增加，TST中的不動(dòng)時(shí)間明顯減少。且正常小鼠海馬腦區(qū)給予GGOH，不會(huì)引起糖水偏好率和懸尾不動(dòng)時(shí)間的改變，說明HMGCR的下游產(chǎn)物GGOH具有快速抗抑郁的效應(yīng)。給予抑郁模型鼠海馬腦區(qū)注射GGOH后，p-ERK/ERK沒有明顯改變，而p-p38/p38比值明顯增加，p-JNK/JNK比值也增加，p-CREB明顯增加，說明HMGCR-MVA-GGOH可以通過激活M