代謝型谷氨酸受體在神經(jīng)病理性疼痛中的表達(dá)和功能研究.pdf

1、第一部分神經(jīng)病理性疼痛中脊髓水平各型代謝型谷氨酸受體的表達(dá)改變目的：研究坐骨神經(jīng)慢性緊縮性模型(CCI)神經(jīng)病理性疼痛形成過程中脊髓背角各型代謝型谷氨酸受體(mGluRs)表達(dá)的改變。 方法：雄性SD大鼠42只隨機(jī)分為7組(n=6)：(1)Con組：空白對照組；(2)S3組：假手術(shù)3天組，假手術(shù)術(shù)后3天測痛閾取標(biāo)本；(3)C3組：CCI3天組，CCI術(shù)后3天測痛閾取標(biāo)本；(4)S7組：假手7天組；(5)C7組：CCI7天組；(6

2、)S14組：假手術(shù)14天組；(7)C14組：CCI14天組。CCI模型采用慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎的方法建立，假手術(shù)組僅顯露坐骨神經(jīng)，并不進(jìn)行結(jié)扎。CCI手術(shù)后3天、7天、14天，分別用VonFrey纖毛刺激針測量大鼠機(jī)械性痛閾后處死大鼠，取手術(shù)側(cè)腰膨大脊髓背角的標(biāo)本，用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈(RT-PCR)技術(shù)，從轉(zhuǎn)錄水平研究mGluR1型、mGluR2型、mGluR3型、mGluR4型、mGluR5型和mGluR7型在神經(jīng)病理性疼痛中的表達(dá)變化。

3、 結(jié)論：CCI神經(jīng)病理性疼痛時(shí)脊髓水平各型mGluRsmRNA表達(dá)量發(fā)生特異性變化，提示mGluRs表達(dá)變化與神經(jīng)病理性疼痛有關(guān)。 第二部分CCI神經(jīng)病理性疼痛中脊髓水平代謝型谷氨酸受體5型蛋白質(zhì)的表達(dá)改變目的：研究神經(jīng)病理性疼痛形成過程中脊髓背角代謝型谷氨酸受體5型(mGluR5)蛋白水平表達(dá)的改變。 方法：雄性SD大鼠42只隨機(jī)分為7組(n=6)：(1)Con組：空白對照組；(2)S3組：假手術(shù)3天組

4、，假手術(shù)術(shù)后3天測痛閾取標(biāo)本；(3)C3組：CCI3天組，CCI術(shù)后3天測痛閾取標(biāo)本；(4)S7組：假手7天組；(5)C7組：CCI7天組；(6)S14組：假手術(shù)14天組；(7)C14組：CCI14天組。CCI模型采用慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎的方法建立，假手術(shù)組僅顯露坐骨神經(jīng)，并不進(jìn)行結(jié)扎。CCI手術(shù)后3天、7天、14天，分別用VonFrey纖毛刺激針測量大鼠機(jī)械性痛閾后處死大鼠，取手術(shù)側(cè)腰膨大脊髓背角的標(biāo)本，用免疫蛋白印跡技術(shù)，從翻譯水平研究

5、mGluR5在神經(jīng)病理性疼痛中表達(dá)變化。 結(jié)論：脊髓水平的mGluR5在CCI神經(jīng)病理性疼痛模型早期表達(dá)明顯升高，證實(shí)mGluR5蛋白水平表達(dá)與基因表達(dá)變化趨勢(見第一部分)相一致，提示mGluR5參與神經(jīng)病理性疼痛早期的形成。 第三部分代謝型谷氨酸受體5型拮抗劑MPEP鞘內(nèi)給藥預(yù)防神經(jīng)病理性疼痛的實(shí)驗(yàn)研究目的：研究代謝型谷氨酸受體5型(mGluR5)拮抗劑MPEP對大鼠CCI模型中神經(jīng)病理性疼痛的防治作用。

6、 方法：雄性SD大鼠24只，隨機(jī)分為4組(n=6)：(1)MPEP+CCI組：該組大鼠在CCI術(shù)前15分鐘和術(shù)后3天內(nèi)每日兩次鞘內(nèi)給予MPEP100nmol(容量為20μl)；(2)鹽水+CCI組：以同等容量生理鹽水替代MPEP，在CCI術(shù)前15分鐘和術(shù)后3天內(nèi)給藥；(3)MPEP+假手術(shù)組：以假手術(shù)替代CCI手術(shù)；(4)鹽水+假手術(shù)組。CCI模型采用慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎的方法建立，假手術(shù)組僅顯露坐骨神經(jīng)，并不進(jìn)行結(jié)扎。CCI前和CC