MMP-9、ZO-1及Cx43在蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣機制中的相關研究.pdf

1、目的：觀察實驗性蛛網(wǎng)膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后基底動脈(basilar artery,BA) ZO-1的表達變化及與腦血管痙攣（cerebral vasospasm,CVS）的相關性；觀察MMP-9抑制劑（SB-3CT）干預后BA中MMP-9、ZO-1、Cx43的表達變化以及對SAH后CVS的干預作用，探討三者之間的相互聯(lián)系，初步揭示SAH后CVS可能機制。
　　方法：⑴隨機分成SAH組

2、、假注血組，其中SAH組根據(jù)不同時間點再分為1d，3d，5d，7d，14d等亞組；利用枕大池二次注血法構(gòu)建大鼠SAH模型，假注血組僅注入等量NS；HE染色觀察BA病理及管壁形態(tài)學變化，運用免疫組化及western blot分析BA中ZO-1的表達水平。⑵隨機分成SAH組、假注血組、安慰劑組、治療組，利用枕大池二次注血法構(gòu)建大鼠SAH模型，治療組于注血前注入SB-3CT0.2mg/0.1ml，安慰組于注血前注入等量的DMSO；在CVS高峰

3、時期（第3天），HE染色觀察BA病理及管壁形態(tài)學變化，免疫組化評估BA中ZO-1、Cx43的表達，western blot分析BA中MMP-9、ZO-1、Cx43的表達。
　　結(jié)果：①HE染色光鏡下發(fā)現(xiàn)SAH組BA均存在不同程度的狹窄及內(nèi)皮紊亂，其中在SAH后3d最為顯著，其管腔內(nèi)徑約為假注血組的44％，管壁厚度約為假注血組的3.5倍，之后BA狹窄程度逐漸降低，至14d時大致恢復正常。免疫組化及western blot結(jié)果示SAH

4、組BA中ZO-1的表達均存在不同程度的下降，其中在第3d時降至最低，之后逐漸恢復，至第14d時基本接近正常。②HE染色結(jié)果示SAH組、安慰劑組BA管腔顯著狹窄，內(nèi)皮明顯紊亂；而與SAH組、安慰劑組相比較，治療組BA形態(tài)結(jié)構(gòu)尚完整，內(nèi)皮層僅發(fā)生部分紊亂，基底動脈內(nèi)彈力層輕度皺縮，其管徑出現(xiàn)明顯回擴（約為SAH組的1.7倍），管壁增厚程度降低（約為SAH組的59%），對比差異顯著（P<0.01）。免疫組化及western blot結(jié)果示：與

5、假注血組相比較，SAH組和安慰劑組BA中MMP-9、Cx43的表達明顯升高，ZO-1的表達卻顯著下降；而與SAH組對比，治療組MMP-9、Cx43的表達較明顯降低（P<0.05），ZO-1的表達顯著回升（P<0.01）。
　　結(jié)論：⑴枕大池二次注血法成功構(gòu)建大鼠SAH模型，可觀察到BA壁中細胞形態(tài)發(fā)生明顯變化，管腔縮窄、管壁增厚程度顯著等，說明SAH后產(chǎn)生明顯的CVS。⑵SAH后ZO-1的表達明顯下降，下降趨勢與不同時相CVS程度