葡萄果穗附生微生物區(qū)系分析及葡萄灰霉病拮抗菌篩選.pdf

1、葡萄灰霉病是國內外重要的葡萄病害之一，每年由此病造成的產量損失很大?，F在的防治方法主要是農業(yè)防治和化學防治，但是這兩種措施均存在一定的局限性。 本文對葡萄果穗附生微生物區(qū)系分析、附生拮抗菌的篩選、鑒定以及附生拮抗細菌的定殖和防治試驗的進行研究，得出以下主要結論： 1.葡萄果穗附生微生物區(qū)系分析本試驗采用稀釋平板分離法對處于幼果膨大期、著色期、成熟期的抗病品種巨峰、中抗品種紅地球、感病品種京亞果穗的附生微生物區(qū)系進行分析。

2、結果表明：葡萄果穗附生微生物的數量隨生育期及品種的不同而有差異，抗感病品種間附生微生物數量差異顯著。自膨大期到成熟期真菌和酵母菌數量逐漸增加；細菌數量先增加后下降，總菌數也在著色期達到最大值，而后呈下降趨勢，但數量變化不大；自幼果膨大期到成熟期，細菌數量一直占優(yōu)勢。病果穗附生的真菌、細菌和酵母菌的數量均高于健果穗，果穗發(fā)病后真菌的種類減少，細菌和酵母菌的種類變化不大。 2.優(yōu)勢拮抗細菌的篩選在葡萄果穗上分離出的13種附生細菌經平

3、板對峙試驗初篩，篩選出11種對葡萄灰霉病有抑制作用的拮抗菌。 將11種具有拮抗作用的附生細菌對灰霉孢子抑制試驗、對灰霉病菌菌絲生長的抑制試驗及離體果的防治試驗結果均表明，B5和B12菌株的抑制能力最強，是優(yōu)勢拮抗菌株，而B4和B6菌株的抑制能力最差，其它7種拮抗細菌的抑菌能力均在它們之間，波動不大。通過離體果的防治試驗表明了先噴施拮抗菌發(fā)酵液后接種病原菌的防治效果與先接種病原菌而后噴施拮抗菌發(fā)酵液的防治效果有顯著差異，這說明了拮

4、抗菌的保護作用好于治療作用。 3.優(yōu)勢拮抗細菌B5、B12的16srDNA的鑒定本試驗采用傳統(tǒng)分類方法即菌落大小和形態(tài)、革蘭氏染色和分子生物學方法16SrDNA相結合，將拮抗菌B5、B12菌株進行了PCR擴增、測序，將測出的菌16SrDNA序列用Blast軟件、Clustal(1.8)軟件及Mega軟件對其序列進行了同源性分析和系統(tǒng)發(fā)育分析，初步確立了菌株在細菌系統(tǒng)發(fā)育學上的地位。B5屬于芽孢桿菌屬(Bacillus sp.)；