葡萄果穗附生微生物區(qū)系分析及葡萄灰霉病拮抗菌篩選.pdf

1、葡萄灰霉病是國內(nèi)外重要的葡萄病害之一，每年由此病造成的產(chǎn)量損失很大?，F(xiàn)在的防治方法主要是農(nóng)業(yè)防治和化學(xué)防治，但是這兩種措施均存在一定的局限性。 本文對葡萄果穗附生微生物區(qū)系分析、附生拮抗菌的篩選、鑒定以及附生拮抗細(xì)菌的定殖和防治試驗(yàn)的進(jìn)行研究，得出以下主要結(jié)論： 1.葡萄果穗附生微生物區(qū)系分析本試驗(yàn)采用稀釋平板分離法對處于幼果膨大期、著色期、成熟期的抗病品種巨峰、中抗品種紅地球、感病品種京亞果穗的附生微生物區(qū)系進(jìn)行分析。

2、結(jié)果表明：葡萄果穗附生微生物的數(shù)量隨生育期及品種的不同而有差異，抗感病品種間附生微生物數(shù)量差異顯著。自膨大期到成熟期真菌和酵母菌數(shù)量逐漸增加；細(xì)菌數(shù)量先增加后下降，總菌數(shù)也在著色期達(dá)到最大值，而后呈下降趨勢，但數(shù)量變化不大；自幼果膨大期到成熟期，細(xì)菌數(shù)量一直占優(yōu)勢。病果穗附生的真菌、細(xì)菌和酵母菌的數(shù)量均高于健果穗，果穗發(fā)病后真菌的種類減少，細(xì)菌和酵母菌的種類變化不大。 2.優(yōu)勢拮抗細(xì)菌的篩選在葡萄果穗上分離出的13種附生細(xì)菌經(jīng)平

3、板對峙試驗(yàn)初篩，篩選出11種對葡萄灰霉病有抑制作用的拮抗菌。 將11種具有拮抗作用的附生細(xì)菌對灰霉孢子抑制試驗(yàn)、對灰霉病菌菌絲生長的抑制試驗(yàn)及離體果的防治試驗(yàn)結(jié)果均表明，B5和B12菌株的抑制能力最強(qiáng)，是優(yōu)勢拮抗菌株，而B4和B6菌株的抑制能力最差，其它7種拮抗細(xì)菌的抑菌能力均在它們之間，波動(dòng)不大。通過離體果的防治試驗(yàn)表明了先噴施拮抗菌發(fā)酵液后接種病原菌的防治效果與先接種病原菌而后噴施拮抗菌發(fā)酵液的防治效果有顯著差異，這說明了拮

4、抗菌的保護(hù)作用好于治療作用。 3.優(yōu)勢拮抗細(xì)菌B5、B12的16srDNA的鑒定本試驗(yàn)采用傳統(tǒng)分類方法即菌落大小和形態(tài)、革蘭氏染色和分子生物學(xué)方法16SrDNA相結(jié)合，將拮抗菌B5、B12菌株進(jìn)行了PCR擴(kuò)增、測序，將測出的菌16SrDNA序列用Blast軟件、Clustal(1.8)軟件及Mega軟件對其序列進(jìn)行了同源性分析和系統(tǒng)發(fā)育分析，初步確立了菌株在細(xì)菌系統(tǒng)發(fā)育學(xué)上的地位。B5屬于芽孢桿菌屬(Bacillus sp.)；