2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、MHC型別不同的供/受者間進(jìn)行移植后會(huì)發(fā)生強(qiáng)烈的排斥反應(yīng),其機(jī)制主要是同種反應(yīng)性T細(xì)胞(簡稱同種T細(xì)胞)識(shí)別同種異體組織抗原(簡稱同種抗原)并產(chǎn)生應(yīng)答。大量免疫抑制劑的應(yīng)用過度的抑制了機(jī)體的免疫系統(tǒng),使受者處于罹患嚴(yán)重感染的風(fēng)險(xiǎn)之中,因而誘導(dǎo)同種異體耐受成為亟待解決的問題。HLA-G是一種非經(jīng)典的HLAⅠ類分子,其限制性的組織分布、有限的基因多態(tài)性提示其為一種誘導(dǎo)免疫耐受的分子。體外研究資料顯示HLA-G通過與抑制性受體的結(jié)合誘導(dǎo)T、B

2、、NK、DC、巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞的免疫耐受,臨床病例研究也顯示HLA-G陽性的受者與陰性受者相比,急性排斥期縮短,慢性排斥發(fā)生率降低。最新研究表明HLA-G二聚體形式對(duì)于HLA-G與抑制性受體的結(jié)合以及生物學(xué)功能的發(fā)揮都起著至關(guān)重要的作用。本研究采用基因工程技術(shù)構(gòu)建并制備了可溶性HLA-G二聚體,并利用混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)模型研究了該分子抑制同種T細(xì)胞應(yīng)答的作用。論文分為2個(gè)部分,主要內(nèi)容與結(jié)果如下: 一﹑可溶性HLA-G二聚體的制

3、備 本研究利用基因工程技術(shù)將編碼HLA-G重鏈胞外段(α1-α3區(qū))的基因與編碼人IgG-Fc段的基因融合插入到真核表達(dá)載體pcDNA3.1+中形成pcDNA3.1+[sHLA-G/IgG] 質(zhì)粒。通過電穿孔技術(shù)將質(zhì)粒導(dǎo)入HLAⅠ類分子和IgG重鏈缺陷的721.221細(xì)胞中表達(dá),篩選出高效表達(dá)的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染子(dimer-721.221),經(jīng)特異性ELISA和western blotting鑒定表達(dá)的HLA-G/IgG融合蛋白具有正

4、確的分子量和空間構(gòu)象,并通過IgG-Fc段形成了二聚體,將該融合蛋白命名為可溶性HLA-G二聚體。 二﹑可溶性HLA-G二聚體抑制同種T細(xì)胞應(yīng)答的研究 本研究利用滅活的T1與HLA陰性的健康人外周血淋巴細(xì)胞的混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)模型模擬同種反應(yīng),研究了HLA-G二聚體抑制同種T細(xì)胞應(yīng)答的作用。結(jié)果顯示,HLA-G二聚體在納摩爾水平抑制同種T細(xì)胞應(yīng)答:抑制同種反應(yīng)性CD8+、CD4+T細(xì)胞的活化和增殖,抑制同種CTL細(xì)胞的產(chǎn)生

5、,并且這種抑制作用比HLA-G單體要強(qiáng)。此外,HLA-G二聚體還可上調(diào)同種反應(yīng)性CD8+T細(xì)胞表面ILT2的表達(dá),而這種作用又可進(jìn)一步促進(jìn)HLA-G二聚體的抑制功能。鑒于HLA-G二聚體與受體的高親和力以及抑制同種T細(xì)胞應(yīng)答的高效率,該分子可望應(yīng)用于HLA-G/受體的結(jié)合研究以及誘導(dǎo)同種移植耐受。 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)和意義: 1.本研究首次利用基因工程技術(shù)構(gòu)建、表達(dá)了可溶性HLA-G二聚體,證實(shí)了該分子在納摩爾水平抑制同種反

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