可溶性HLA-G二聚體在體外抑制樹突狀細(xì)胞成熟和M1型巨噬細(xì)胞極化.pdf

1、HLA-G是一種非經(jīng)典的HLAⅠ類分子,可以通過與抑制性受體結(jié)合誘導(dǎo)廣泛的免疫耐受。大量研究證實可溶性HLA-G二聚體與其抑制性受體的結(jié)合力更強,可以誘導(dǎo)更強的免疫耐受。這些抑制性受體包括ILT-4和ILT-2,主要表達(dá)在T細(xì)胞,B細(xì)胞,巨噬細(xì)胞,NK,DC等表面。DC是重要的抗原提呈細(xì)胞,連接了固有免疫與適應(yīng)性免疫,它們可以發(fā)現(xiàn)、捕獲,加工處理外源性抗原并提呈給T細(xì)胞。它們與原始T細(xì)胞的相互作用在誘導(dǎo)T細(xì)胞分化成Th1/Th2細(xì)胞、調(diào)

2、節(jié)性T細(xì)胞中起重要作用。近年來有不少文獻(xiàn)報道可溶性HLA-G二聚體能夠通過與抑制性受體ILT-4結(jié)合抑制DC的成熟,但也有人報道可溶性HLA-G二聚體對DC的成熟沒有影響。本研究擬探討可溶性HLA-G二聚體對DC成熟的作用,以期這種二聚體可以抑制DC的成熟,進一步誘導(dǎo)T細(xì)胞、B細(xì)胞的免疫耐受,降低移植排斥反應(yīng)的程度。巨噬細(xì)胞參與和促進炎癥反應(yīng),根據(jù)其微環(huán)境的不同可分為經(jīng)典的M1與選擇性激活的M2。前者與炎癥反應(yīng)和組織損傷有關(guān);后者可促進

3、血管生成和組織修復(fù),并且參與寄生蟲感染與過敏反應(yīng),在一定條件下兩者可以相互轉(zhuǎn)化。由于巨噬細(xì)胞表面也存在可溶性HLA-G二聚體的受體,所以本實驗將探討可溶性HLA-G二聚體對這兩種細(xì)胞極化的影響,研究可溶性HLA-G二聚體在炎癥反應(yīng)中的作用。論文分為2個部分,主要內(nèi)容與結(jié)果如下:
　　1.可溶性HLA-G二聚體在體外可抑制樹突狀細(xì)胞成熟
　　由人外周血分離得到PBMC,貼壁單核細(xì)胞在GM-CSF、IL-4的作用下分化成未成熟D

4、C,而TNF-α或IFN-γ可促進DC成熟。同時在此過程中加入可溶性HLA-G二聚體,并設(shè)置721.221上清作為對照。用流式抗體CD1a,CD83,CD40染色,流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞表面這三種分子的表達(dá)水平。檢測結(jié)果顯示:可溶性HLA-G二聚體組DC表面CD83及CD40表達(dá)水平比721.221上清對照組明顯下降。
　　2.可溶性HLA-G二聚體在體外可抑制M1型巨噬細(xì)胞極化
　　由人外周血分離得到PBMC,貼壁單核細(xì)胞