髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1、血清淀粉樣蛋白A和降鈣素原在慢性阻塞性肺疾病急性加重中的應(yīng)用.pdf

1、背景:
　　慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一種慢性呼吸系統(tǒng)疾病。
　　AECOPD可能與感染等因素導(dǎo)致COPD肺部和全身炎癥過(guò)程進(jìn)一步放大有關(guān);引起AECOPD的病因不同,機(jī)體的炎癥反應(yīng)也可能存在差異。因此,從炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子中尋找AECOPD的生物標(biāo)記,建立AECOPD早期診斷和分型分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),具有科學(xué)性和可行性。
　　髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(

2、triggering receptor expressed on myeloid cell-1,TREM-1)、血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A,SAA)和降鈣素原(Procalcitionin,PCT)是新近較受關(guān)注的生物標(biāo)志物,有研究顯示三者在AECOPD早期診斷、病原學(xué)診斷上有重要價(jià)值。TREM-1和SAA可能為AECOPD的病情嚴(yán)重程度判斷上提供客觀依據(jù)。
　　TREM-1是新近發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞膜受體,具有激發(fā)和

3、放大炎癥反應(yīng)的作用,最初發(fā)現(xiàn)于膿毒血癥,在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮主導(dǎo)作用,是診斷感染性疾病的標(biāo)志物。TREM-1屬于免疫球蛋白超家族,在髓系細(xì)胞上表達(dá)。TREM-1通過(guò)特殊的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑促進(jìn)促炎介質(zhì)的產(chǎn)生、抑制抗炎介質(zhì)的表達(dá)而激活和放大炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng),從而放大感染所致的炎性反應(yīng)信號(hào)。同時(shí)TREM-1能引起中性粒細(xì)胞脫顆粒、呼吸爆發(fā)和吞噬反應(yīng),延長(zhǎng)炎癥部位中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的生存。研究表明,細(xì)菌和真菌感染可使痰液和血液的TREM-1的表達(dá)明顯

4、上調(diào),但在非感染炎癥性疾病以及由分枝結(jié)核桿菌引起的肉芽腫性炎癥或異物肉芽腫中TREM-1卻是低表達(dá)。Radsak的研究顯示穩(wěn)定期COPD患者的TREM-1較健康者顯著增高。Rohde的新近研究發(fā)現(xiàn)痰病毒PCR陽(yáng)性的AECOPD患者血清TREM-1的水平明顯低于陰性的患者。TREM-1出現(xiàn)早,半衰期短,與體內(nèi)感染同步,可作為感染性疾病診斷的新指標(biāo),在AECOPD的病因分型和分級(jí)中,可能具有非常重要的意義。
　　血清淀粉樣蛋白A(se

5、rum amyloid A,SAA)是一個(gè)非常敏感的急性時(shí)相蛋白。是由同一簇基因編碼的一組多形性蛋白,主要在肝細(xì)胞合成,但肝外器官也可產(chǎn)生,在正常組織中、動(dòng)脈粥樣硬化、阿爾茨海默病、炎癥反應(yīng)和腫瘤組織中可表達(dá)。當(dāng)機(jī)體受到各種炎癥因素刺激時(shí),8h～12h內(nèi)SAA即可達(dá)到峰值,反應(yīng)快速,增高幅度可達(dá)正常值的1000倍;半衰期也極短,只有50min,因此機(jī)體炎癥控制后,可迅速降至正常。這種特性使得SAA成為目前最敏感的炎癥標(biāo)志物之一,較血沉和

6、白細(xì)胞升高更早、更靈敏可靠,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)SAA水平或許有助于判斷病情的變化。Yamada的研究顯示SAA在細(xì)菌和病毒感染時(shí)均升高,細(xì)菌感染時(shí)升高明顯。Hutchinson的研究顯示SAA在AECOPD患者病毒感染時(shí)升高。Bozinovski等報(bào)道在AECOPD中SAA升高,且其與嚴(yán)重度分級(jí)密切相關(guān)。SAA可能有助于AECOPD的早期識(shí)別、病因診斷和病情嚴(yán)重度分級(jí)評(píng)估。
　　降鈣素原(Procalcitionin,PCT)是降鈣素的前肽

7、,由116個(gè)氨基酸組成,相對(duì)分子質(zhì)量為13000,血清中半衰期約為25h～30h,生理狀態(tài)下降鈣素原由甲狀腺c細(xì)胞產(chǎn)生,血清中含量極低。細(xì)菌感染和膿毒血癥等情況下,降鈣素原水平明顯升高,但自身免疫性炎癥或病毒感染時(shí)降鈣素原水平升高并不明顯。因此被認(rèn)為是診斷細(xì)菌感染、預(yù)測(cè)其病情和預(yù)后的良好的生物標(biāo)記。Stolz的研究結(jié)果提示,根據(jù)PCT水平指導(dǎo)AECOPD的抗生素治療,可以安全地減少下呼吸道低濃度細(xì)菌感染患者的抗生素應(yīng)用。Lacoma的研

8、究提示PCT在肺炎及AECOPD患者中較穩(wěn)定期COPD患者均升高。
　　感染是AECOPD的主要誘因,TREM-1、SAA和PCT與AECOPD、感染具有較強(qiáng)的相關(guān)性,通過(guò)研究TREM-1、SAA和PCT在AECOPD中的變化及其與病原學(xué)的相關(guān)性,在COPD的防治和機(jī)制研究中將有重要的意義和廣泛的應(yīng)用前景。
　　目的:
　　探討髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)、血清淀粉樣蛋白A(SAA)、降鈣素原(PCT)在慢性阻

9、塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的臨床應(yīng)用。
　　方法:
　　1.納入對(duì)象2010年1月至2011年6月因COPD在門(mén)診或住院部診治的穩(wěn)定期患者40例,GOLD(肺功能)分級(jí):Ⅰ級(jí)5例,Ⅱ級(jí)16例,Ⅲ級(jí)13例,Ⅳ級(jí)6例。
　　2.納入標(biāo)準(zhǔn)
　　患者年齡40～80歲,COPD診斷需符合慢性阻塞性肺疾病診治指南(2007年修訂版)診斷標(biāo)準(zhǔn)。所有患者前一年至少有1次AECOPD,處于穩(wěn)定期即近4周無(wú)呼吸道感染及急性

10、加重。
　　3.排除標(biāo)準(zhǔn)
　　(1)合并嚴(yán)重心腦血管疾病或嚴(yán)重軀體疾病(如心肌梗塞、不穩(wěn)定型心絞痛、腦血管意外、惡性腫瘤、腎功能不全等)。
　　(2)除COPD外的長(zhǎng)期慢性炎癥疾病,如結(jié)締組織病、既往診斷明確的哮喘和支氣管擴(kuò)張。
　　(3)本次調(diào)查后1周內(nèi)發(fā)生AECOPD者。
　　(4)妊娠、哺乳期婦女。
　　(5)有慢性酗酒史、精神病史或?yàn)E用藥物史或任何影響依從性的因素。
　　(6)不能留取血

11、、痰或尿液標(biāo)本者。
　　(7)無(wú)法完成肺功能檢測(cè)者。
　　(8)正在參加其它藥物試驗(yàn)者。
　　(9)其它情況無(wú)法完成實(shí)驗(yàn)者。
　　4.資料及標(biāo)本收集
　　(1)記錄患者的一般資料,吸煙狀況、家族史、呼吸道癥狀(咳嗽、咳痰、喘息、氣促和其它)、急性加重情況(呼吸道癥狀、用藥和住院情況)、呼吸困難和癥狀評(píng)分和合并疾病等。
　　(2)對(duì)患者進(jìn)行體格檢查及X線胸片、心電圖、肺通氣功能+支氣管舒張?jiān)囼?yàn)、外周血氧

12、飽和度檢查及血常規(guī)等常規(guī)檢查,并留取靜脈血標(biāo)本待測(cè)。
　　(3)與患者保持電話聯(lián)系密切隨訪,詳細(xì)告知什么情況下為穩(wěn)定期、急性加重,出現(xiàn)病情變化時(shí)及早到院診治,進(jìn)行體格檢查及X線胸片、心電圖、肺通氣功能+支氣管舒張?jiān)囼?yàn)、外周血氧飽和度檢查及血常規(guī)等常規(guī)檢查,并再次留取靜脈血及痰液標(biāo)本。痰液標(biāo)本立即送檢行病原學(xué)檢查,所有靜脈血標(biāo)本經(jīng)處理后均于-70℃凍存待測(cè)。
　　5.測(cè)定方法
　　TREM-1、SAA檢測(cè)方法:均采用EL

13、ISA法,操作按試劑盒和相關(guān)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行(TREM-1試劑盒為美國(guó)R&D System公司生產(chǎn),SAA試劑盒為美國(guó)BIOSOURCE公司生產(chǎn))。
　　PCT檢測(cè)方法:采用酶聯(lián)熒光分析法(ELFA法),使用法國(guó)梅里埃BioMerieux公司VIDAS全自動(dòng)酶聯(lián)熒光分析儀及配套試劑進(jìn)行血清PCT全自動(dòng)定量檢測(cè)。
　　病原學(xué)檢測(cè):痰細(xì)菌培養(yǎng):可用咳深部痰或誘導(dǎo)痰標(biāo)本,涂片檢查為合格痰標(biāo)本后送檢,采用法國(guó)生物梅里埃(BioMerieu

14、x)公司的VITEK2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀將分離菌株鑒定到種。病毒檢測(cè):采用痰標(biāo)本,采用美國(guó)ABI公司的ABI7500熒光定量PCR儀運(yùn)用聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(PCR)方法進(jìn)行鑒定。
　　6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　全部數(shù)據(jù)采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。計(jì)量資料為正態(tài)分布時(shí)用x±s描述,兩樣本間比較用t檢驗(yàn),多樣本間比較用方差分析;計(jì)量資料呈非正態(tài)分布,用中位數(shù)描述,采用非參數(shù)分析檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P<0.0

15、5有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果:
　　1、入選40例COPD患者中,男性患者37例,女性患者3例,平均年齡66.13±6.32歲。吸煙者34例,非吸煙者5例,戒煙者1例。既往有肺部手術(shù)史(炎癥假瘤)者1例,高血壓病史者4例,胃腸疾病史3例,骨關(guān)節(jié)疾病史2例。所有COPD患者穩(wěn)定期胸片檢查符合COPD表現(xiàn),急性加重時(shí)胸片無(wú)肺實(shí)質(zhì)滲出性炎癥改變。心電圖均為竇性心律,偶發(fā)室性早搏者2例,偶發(fā)房性早搏者3例,有完全或不完全性右束支傳導(dǎo)阻

16、滯者5例,T波輕度低平者2例。急性加重時(shí)有3例患者出現(xiàn)竇性心動(dòng)過(guò)速,余患者心電圖較穩(wěn)定期無(wú)明顯變化。
　　2、AECOPD患者血白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞絕對(duì)值、血清TREM-1、SAA水平及血清PCT陽(yáng)性率均較穩(wěn)定期升高。
　　3、痰細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果陽(yáng)性AECOPD患者血清TREM-1水平、PCT陽(yáng)性率較陰性患者均升高,但SAA水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。痰病毒PCR結(jié)果陽(yáng)性AECOPD患者血清SAA水平較陰性患者升高,但TREM-1水平、

17、PCT陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4、將AECOPD患者按Anthonisen標(biāo)準(zhǔn)分為Ⅰ～Ⅲ型共三組,運(yùn)用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)對(duì)比各組間TREM-1、SAA水平,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　1、SAA、PCT可作為早期判斷AECOPD的客觀指標(biāo)。
　　2、AECOPD患者中如其TREM-1水平升高、PCT陽(yáng)性提示急性加重的誘因可能與下呼吸道細(xì)菌感染有關(guān)。
　　3、AECOPD患者中如其SAA水平升高、T