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文檔簡介
1、目的:探討Gfi-1(growth factor independent-1)基因的過量表達對小鼠粒-單祖細胞系32D細胞增殖和分化的作用，為進一步研究Gfi-1基因在惡性血液病腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用奠定基礎(chǔ)。
方法:制備含有EGFP的重組慢病毒載體三質(zhì)粒系統(tǒng)，包裝出完整的病毒顆粒并轉(zhuǎn)染32D細胞。通過IL-3撤退實驗、低濃度IL-3增殖實驗和細胞分化實驗來觀察Gfi-1基因的過量表達對32D細胞的影響。
結(jié)果
2、:包裝出完整的病毒顆粒并成功轉(zhuǎn)染32D細胞，流式細胞儀通過檢測綠色熒光蛋白分選出95[％]以上感染了慢病毒的32D細胞，RT-PCR凝膠電泳鑒定出有g(shù)fi-1基因條帶的表達；IL-3撤退實驗顯示，轉(zhuǎn)染了Gfi-1的32D細胞(32D/gfi-1)于撤退后11天完全死亡、空病毒感染的32D細胞(32D/plox)在撤退后9天完全死亡而未做任何處理的32D細胞于撤退后6天完全死亡；低濃度IL-3增殖實驗顯示，32D/gfi-1對IL-3的依
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