TNF-α、NF-kB 及氧自由基在大鼠急性酒精性腎損傷中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：本研究通過大量酒精灌胃的方法建立急性酒精性腎損傷動(dòng)物模型，探討TNF-α、NF-kB及氧自由基在大鼠急性酒精性腎損傷中的表達(dá)及意義。
　　方法：酒精性腎損傷動(dòng)物模型制備：Wistar大鼠（清潔級(jí)）隨機(jī)分為兩組，模型組給予56％酒精10g/kg/d，分三次灌胃，共5天；對(duì)照組給予等量的生理鹽水灌胃。實(shí)驗(yàn)第3、5天末次灌胃后12小時(shí)處死動(dòng)物。心臟采血分離血清，生化檢測(cè)血肌酐、尿素氮含量，用硫代巴比妥酸（TBA）法測(cè)定血清丙二醛（

2、MDA）的含量，用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定血清超氧化物歧化酶（SOD）的含量。腎臟病理學(xué)檢測(cè)：采血后立即取腎組織用10%中性福爾馬林固定，腎組織石蠟切片，常規(guī)HE染色，觀察腎組織病理學(xué)改變。免疫組織化學(xué)染色：免疫組化染色采用SABC法，測(cè)定TNF-α和NF-kB。
　　結(jié)果：血清學(xué)指標(biāo)：實(shí)驗(yàn)第3天和第5天，模型組與對(duì)照組比較血清肌酐值（20.84±3.41IU/L vs15.61±1.84 IU/L、25.61±4.75 IU/L vs

3、17.43±4.11 IU/L，均 P<0.01）和尿素氮值（8.68±0.84 IU/L vs5.34±0.73 IU/L、10.20±1.89 IU/L vs6.92±1.34IU/L，均 P<0.01）有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；模型組第3天與第5天比較血清肌酐和尿素氮值有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。模型組第3天與第5天血清MDA水平均高于對(duì)照組(P<0.01)，血清SOD活性相反(P<0.01)，MDA含量與SOD活力呈負(fù)相關(guān)(P<0.01

4、r=-0.639)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。病理學(xué)檢查：對(duì)照組腎小球結(jié)構(gòu)正常，部分腎小管輕度變性考慮取材時(shí)缺血缺氧引起；模型組第3天腎小管腫脹明顯，部分上皮細(xì)胞脫落，胞漿界限不清，近曲小管管腔閉鎖，可見空泡及核碎裂。模型組第5天腎小管進(jìn)一步腫脹，腎小管輪廓更不清，腎小管上皮壞死明顯，核消失，可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。TNF-α主要在腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)呈陽性表達(dá)，實(shí)驗(yàn)第3天和第5天，模型組與對(duì)照組比較，TNF-α陽性面積百分比（13.14％±2.60 vs1.

5、30％±0.11，P<0.01；31.1％±5.02 vs1.60％±0.31，P<0.01)明顯增高；模型組第5天與第3天比較陽性表達(dá)率明顯增高（P<0.01）。NF-kB主要在腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)呈陽性表達(dá)，實(shí)驗(yàn)第3天和第5天，模型組與對(duì)照組比較NF-kB陽性面積百分比（11.97％±2.47vs1.05％±0.21，P<0.01；29.09％±5.09 vs1.24％±0.42，P<0.01)增高明顯；模型組第5天與第3天比較陽性表達(dá)