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文檔簡介
1、目的:通過動(dòng)態(tài)檢測ARF大鼠腎小管組織中TLR4,同步檢測ARF大鼠血清中的TNF-α,初步探討TLR4與TNF-α在大鼠ARF中的表達(dá)及二者的相關(guān)性。
方法:60只健康SD大鼠,隨機(jī)分為模型組、正常組,每組按檢測時(shí)間又分為3、12、24、48、72小時(shí)共5個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只,模型組腹腔注射GM,劑量為400 mg/kg,連續(xù)2天,每天2次。正常組腹腔注射生理鹽水,檢測血清肌酐、血清尿素氮,造模成功后在各個(gè)觀察時(shí)
2、間點(diǎn)處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,HE觀察腎組織病理變化。ELISA法檢測血清中TNF-α的表達(dá)水平,流式細(xì)胞儀檢測腎小管上皮組織TLR4表達(dá)。
結(jié)果:(1)正常組,在3、12、24、48、72小時(shí),HE顯示腎組織基本正常,各個(gè)時(shí)間點(diǎn)之間檢查SCr、BUN、TNF-α對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),流式細(xì)胞計(jì)數(shù)檢查TLR4熒光強(qiáng)度對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
(2)模型組,HE腎組織符合ARF病理改變,且隨著
3、時(shí)間延長,腎組織損傷趨于嚴(yán)重,3小時(shí)點(diǎn)檢查的SCr、BUN較其它各個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且均高于相對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)正常組。TNF-α在ARF后72小時(shí)內(nèi)呈時(shí)間遞增性表達(dá),3小時(shí)點(diǎn)檢查的TNF-α較其它各時(shí)間點(diǎn)對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 TLR4在ARF3小時(shí)后開始表達(dá)增強(qiáng),12小時(shí)逐漸升高,24小時(shí)達(dá)到高峰,48小時(shí)逐漸下降,72小時(shí)表達(dá)進(jìn)一步減少,24小時(shí)點(diǎn)與其它時(shí)間點(diǎn)對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)
4、。
(3)正常組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)TNF-α和相對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)TLR4對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。模型組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)TNF-α和相對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的TLR4呈正相關(guān)(r=0.582,P=0.041<0.05)。
結(jié)論:(1)在GM致大鼠ARF后72小時(shí)內(nèi),TLR4在腎小管上皮組織中表達(dá)升高,在ARF后24小時(shí)達(dá)到峰值,TNF-α的表達(dá)呈時(shí)間遞增性。進(jìn)一步證明了TLR4和TNF-α與ARF中的炎性損傷相關(guān)。
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